石杉堿甲的制備及其藥理學(xué)和藥效學(xué)研究.pdf

1、本試驗選用的千層塔由重慶某藥廠提供，試驗測定了提取石杉堿甲所需的酸的種類、酸的pH值、提取時間、堿化pH值的單因子實驗和萃取次數(shù)、萃取倍比的雙因子試驗，還有在提取生物堿的過程中，為了獲得最大提取率，優(yōu)化酸提倍比、酸提次數(shù)、酸提時間、酸提溫度這四個參數(shù)，故設(shè)計了L9(34)正交實驗。將提取的石杉堿甲制成灌胃藥，給小白鼠灌胃1個月，然后做藥效學(xué)實驗：小鼠跳臺實驗、小鼠避暗實驗，來檢測石杉堿甲藥效，之后采用不同方法處死小鼠。測定乙酰膽堿含量的

2、小鼠采用瞬間剪頭，液氮冷凍后，在冷凍情況下取腦方式，加入9倍體積的2％高氯酸溶液，冷凍保存；測定乙酰膽堿酯酶的活性和測定乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的活性采用常規(guī)斷頸方式處死，在加冰解剖盤中常溫下取腦方式，然后加入9倍體積的生理鹽水，冷凍保存。需要時用超聲波粉碎機在冰浴中，400-600W下粉碎5分鐘，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心，取上清液進行藥理學(xué)實驗。結(jié)果如下：酸的種類確定為鹽酸，酸提pH值為3.0，堿化pH值為9比較合適，氯仿的體積量在10倍原料量，萃

3、取3次，該采用的最佳工藝是酸提固液倍比1/10、酸提時間45分鐘、酸提次數(shù)3次、酸提溫度55℃為最佳。在此條件下，石杉堿甲的提取率普遍能達到79％。 在藥效學(xué)實驗中，利用小鼠跳臺實驗和小鼠避暗實驗檢測石杉堿甲是否有促進記憶，改善老年癡呆癥癥狀的藥效。把小白鼠制造成三個記憶障礙模型：記憶獲得障礙模型、記憶鞏固障礙模型、記憶再現(xiàn)障礙模型。從實驗結(jié)果顯示的錯誤次數(shù)、潛伏期的指標來看，高劑量組的作用＞中劑量組的作用＞低劑量組的作用，通過

4、與空白組、對照組比較，說明石杉堿甲對上述的三個模型都具有不同程度的促進記憶作用。 在藥理學(xué)實驗中，通過測定小白鼠大腦中的乙酰膽堿含量、乙酰膽堿酯酶活性和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性三個指標，來直接證明石杉堿甲具有促進記憶，改善老年癡呆癥的藥效。利用試劑盒測定結(jié)果表明，乙酰膽堿酯酶活性為高劑量組＜中劑量組＜低劑量組；乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性為高劑量組＞中劑量組＞低劑量組，用羥胺比色法測定乙酰膽堿含量，結(jié)果為高劑量組＞中劑量組＞低劑量組；從直接的指