仿生化蛋殼膜的制備及其作為GTR膜的初步研究.pdf

1、在牙周組織修復(fù)與再生的臨床實踐中，牙周支持組織缺失是大多數(shù)牙周修復(fù)失敗的主要原因之一。如何制備性能優(yōu)良的引導(dǎo)組織再生膜是目前牙周組織修復(fù)與再生中亟待解決的關(guān)鍵問題。天然雞蛋殼膜具有良好的微生物阻隔性、生物相容性以及相互通透的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，并且一側(cè)致密一側(cè)疏松，與引導(dǎo)組織再生（GuidedTissueRegeneration，GTR）膜結(jié)構(gòu)極為相似，但因其力學(xué)強度差不能直接用作GTR膜。合成高分子，如聚乳酸-羥基乙酸共聚物（Poly（la

2、ctic-co-glycolicacid）,PLGA）、聚己內(nèi)酯（Polycaprolactone,PCL）等，機械強度高，可紡性好，但生物相容性較天然高分子差。與其它成膜技術(shù)相比，靜電紡絲技術(shù)制備的納米纖維膜形態(tài)結(jié)構(gòu)類似細(xì)胞間質(zhì)，更有利于細(xì)胞的粘附、生長和分化。基于GTR膜的性能要求，本研究將酸溶液水解技術(shù)、靜電紡絲技術(shù)、致孔劑瀝濾技術(shù)結(jié)合在一起，旨在構(gòu)建一種兼有良好生物相容性和一定力學(xué)強度的新型GTR膜。
　　本研究包含四個部

3、分：
　　1.SEP/PLGA纖維膜的制備及理化性能檢測
　　采用酸溶液水解法從天然雞蛋殼膜中提取可溶性雞蛋殼膜蛋白（SolubleEggshellMembraneProtein,SEP），將其與PLGA按照不同比例共混電紡，制備SEP/PLGA電紡纖維膜。掃描電鏡（ScanningElectronMicroscope,SEM）觀察表面形貌，檢測接觸角、拉伸強度，傅里葉紅外光譜分析混合物構(gòu)象。
　　結(jié)果顯示：不同質(zhì)量比

4、的SEP/PLGA纖維膜均呈現(xiàn)相互交聯(lián)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。紅外光譜測試表明兩者成功共混。隨著纖維膜中PLGA含量的增加，纖維膜的拉伸強度、斷裂伸長率相應(yīng)增大，不同比例間有顯著差異（P<0.05）；隨著SEP含量的增加，纖維膜的接觸角變小，親水性提高，但不同比例間無顯著差異（P>0.05）。實驗表明SEP/PLGA纖維膜具有一定的力學(xué)強度和親水性。
　　2.SEP/PLGA纖維膜體外降解性能的研究
　　將SEP/PLGA纖維膜在模

5、擬體液中降解，分析降解過程中纖維膜結(jié)構(gòu)、表面形貌、質(zhì)量、斷裂強度的變化。
　　結(jié)果顯示：SEP/PLGA纖維膜的質(zhì)量、斷裂強度隨著降解時間的延長而逐漸降低，在降解前2w下降速度較快，從2w到6w速度減慢，在降解6w時纖維吸水發(fā)生溶脹，纖維粘連，但結(jié)構(gòu)仍完整并保持一定的力學(xué)強度。
　　3.SEP/PLGA纖維膜細(xì)胞相容性的評價
　　將牙周膜細(xì)胞（PeriodontalLigamentCell,PDLC）與纖維膜復(fù)合培養(yǎng)，

6、用四氮唑鹽（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dimphenyltetrazoliumbromide,MTT）法評價纖維膜的細(xì)胞相容性。
　　結(jié)果顯示：PDLC在纖維膜表面伸展充分，細(xì)胞之間通過偽足相連。MTT測試表明PDLC在纖維膜有較強的增殖能力。
　　4.電紡SEP/PLGA-PCL雙層不對稱纖維膜及其細(xì)胞相容性研究
　　采用復(fù)層電紡結(jié)合致孔劑瀝濾方法制備雙層不對稱纖維膜——含有大

7、孔徑（疏松）的SEP/PLGA纖維膜層和小孔徑（致密）的聚己內(nèi)酯（PCL）纖維膜層。通過ImageJ軟件對電鏡照片進(jìn)行測量，計算雙層纖維膜的孔徑，并將PDLC細(xì)胞與纖維膜復(fù)合培養(yǎng)，觀察細(xì)胞在致密層和疏松層生長情況，MTT法評價SEP/PLGA-PCL纖維膜的細(xì)胞相容性。
　　結(jié)果顯示：SEP/PLGA纖維膜層（疏松層）孔徑為21±1.3μm，PCL纖維層（致密層）孔徑為3.3±0.4μm。PDLC細(xì)胞與雙層纖維膜的復(fù)合培養(yǎng)觀察，細(xì)