2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩59頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的:腦缺血性疾病是嚴(yán)重危害著當(dāng)代人類健康的常見疾病。眾所周知,大腦神經(jīng)元對(duì)缺血性損害極為敏感,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的缺血后,神經(jīng)元會(huì)大量死亡,因此如何提高神經(jīng)元對(duì)缺血性損害的抵抗力,以保證積極疏通血管、恢復(fù)血流供應(yīng)后神經(jīng)元仍具有正常功能,具有很重要的現(xiàn)實(shí)意義。
   實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),給動(dòng)物突然造成較嚴(yán)重的腦缺血后,海馬CA1區(qū)的神經(jīng)元會(huì)大量死亡。若在此以前,預(yù)先給動(dòng)物造成輕微、短時(shí)、不至于引起神經(jīng)元死亡的腦缺血,間隔一定時(shí)間后,再給此動(dòng)物造

2、成較嚴(yán)重的會(huì)引起大量神經(jīng)元死亡的腦缺血,此時(shí)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元基本不死亡,即神經(jīng)元對(duì)缺血性損害產(chǎn)生了抵抗力。這一現(xiàn)象被稱為腦缺血耐受,預(yù)先給予的輕微、短時(shí)腦缺血稱為腦缺血預(yù)處理。
   谷氨酸是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)一種主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì),由于胞外沒有谷氨酸代謝酶,中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞外液中谷氨酸的穩(wěn)態(tài)主要由興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體來(lái)維持。生理情況下,EAATs轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞外的谷氨酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),降低其在突觸間隙的濃度,在及時(shí)終止突觸傳遞以及

3、防止谷氨酸受體過(guò)度興奮中發(fā)揮重要作用。到目前為止,發(fā)現(xiàn)并克隆了5種高親和性EAATs即GLAST、GLT-1、EAAC1、EAAT4和EAAT5。盡管在神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞上都存在EAATs,但是星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)谷氨酸的攝取能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于神經(jīng)元,而且在很多腦區(qū)最主要的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體是EAAT2。腦缺血時(shí),細(xì)胞外液中的谷氨酸等興奮性氨基酸濃度異常升高,從而造成細(xì)胞損傷,因而其又被稱為興奮性神經(jīng)毒素。如何降低腦缺血時(shí)細(xì)胞外液谷氨酸濃度,以減輕對(duì)神

4、經(jīng)元的損傷,是目前研究的熱點(diǎn)之一。
   我們的前期實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明,腦缺血預(yù)處理可使星形膠質(zhì)細(xì)胞突起延長(zhǎng),并且緊緊環(huán)繞錐體神經(jīng)元,同時(shí)表達(dá)大量的GLT-1,并使谷氨酸的攝取增強(qiáng);損傷性缺血可導(dǎo)致GLT-1表達(dá)下調(diào),尤其在死亡的錐體細(xì)胞周圍下調(diào)的最為明顯,甚至表現(xiàn)為大片的GLT-1表達(dá)缺失;應(yīng)用GLT-1抑制劑DHK抑制GLT-1的功能、或應(yīng)用GLT-1的反義寡核苷酸減少GLT-1的表達(dá),均可抑制腦缺血預(yù)處理的腦保護(hù)作用。這些研究結(jié)

5、果表明,GLT-1參與整體情況下腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受。
   最近有研究報(bào)道,GLT-1存在剪接變異體。到目前為止,已發(fā)現(xiàn)大鼠GLT-1的剪接變異體共有4種,其中3種為C末端剪接變異體,1種為N末端剪接變異體。3種C末端剪接變異體分別被命名為GLT-1a、GLT-1b以及GLT-1c。在大鼠腦組織中GLT-1c表達(dá)量很低,不存在于神經(jīng)元,僅僅局限于血管周圍的星形膠質(zhì)細(xì)胞的終足,以及第三腦室和側(cè)腦室附近的星形膠質(zhì)細(xì)胞。G

6、LT-1a和GLT-1b在大鼠的腦組織中表達(dá)豐富,包括海馬在內(nèi)的廣泛腦區(qū)的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞均表達(dá)GLT-1a和GLT-1b。在一些病理情況下,GLT-1的剪接變異體的表達(dá)可發(fā)生變化。但是究竟GLT-1的何種剪接變異體在腦缺血耐受誘導(dǎo)過(guò)程中發(fā)揮作用還不清楚。所以我們欲探討GLT-1b在腦缺血耐受誘導(dǎo)過(guò)程中是否發(fā)揮作用。
   方法:健康雄性Wistar大鼠135只,體重280-320g,隨機(jī)分為5組。除control組之外,其

7、余大鼠均首先永久凝閉椎動(dòng)脈,恢復(fù)2天后,進(jìn)行sham手術(shù)或腦缺血處理,具體分組如下:①control組;②sham組:只暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈,不阻斷血流;③腦缺血預(yù)處理組:夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈3 min后恢復(fù)再灌注;④損傷性缺血組:夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈8 min后恢復(fù)再灌注;⑤腦缺血預(yù)處理+損傷性缺血組:夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈3min作為腦缺血預(yù)處理,再灌2天后,再次夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈8min作為損傷性缺血,然后恢復(fù)再灌注。除control組之外,其余各組

8、分別于末次手術(shù)后0min、30min、1h、3h、6h、1d、2d、3d、5d、7d時(shí)取海馬腦組織。左側(cè)海馬制成5 μm厚的石蠟切片用于以下實(shí)驗(yàn):1 硫堇染色進(jìn)行神經(jīng)病理學(xué)評(píng)價(jià);2 原位雜交檢測(cè)GLT-1b mRNA的表達(dá)。右側(cè)海馬通過(guò)RT-PCR法觀察GLT-1b mRNA的表達(dá)數(shù)量。
   結(jié)果:
   1 神經(jīng)病理學(xué)評(píng)價(jià)
   硫堇染色顯示,control組大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元排列整齊致密,可見2~3

9、層,細(xì)胞形態(tài)完整、邊界清晰、尼氏小體豐富,胞核大而圓、核仁清晰,ND為203±9.7。Sham組大鼠各時(shí)間點(diǎn)海馬CA1區(qū)均未見明顯損傷,與control組相比,ND均無(wú)明顯變化。CIP組大鼠在各時(shí)間點(diǎn)海馬CA1區(qū)均未見明顯損傷,與sham組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)相比,ND均無(wú)明顯變化。II組在2天內(nèi)未見明顯的錐體神經(jīng)元損傷;至損傷性腦缺血后5 d和7 d時(shí),神經(jīng)元幾乎全部死亡,與sham組相比,ND明顯減少。CIP+II組在各時(shí)間點(diǎn)海馬CA1區(qū)錐體

10、細(xì)胞排列整齊致密,胞核飽滿,核仁較清晰,僅個(gè)別錐體細(xì)胞胞核固縮,無(wú)明顯細(xì)胞缺失,與損傷性腦缺血后7 d組相比,ND明顯升高。這些結(jié)果表明,CIP對(duì)2天后發(fā)生的嚴(yán)重腦缺血再灌注損傷有明顯的對(duì)抗作用,表明腦缺血耐受誘導(dǎo)成功。
   2 原位雜交法觀察GLT-1b mRNA在海馬CA1區(qū)的表達(dá)
   GLT-1b mRNA原位雜交染色顯示形態(tài)完整的錐體神經(jīng)元。Control組海馬CA1區(qū),神經(jīng)元呈圓形,形態(tài)完整,邊界隱約可見,

11、胞漿著色,呈棕色,胞核基本不著色。
   Sham組錐體神經(jīng)元胞漿著色明顯,呈棕色,胞核在0min~6h著色較淺,其余時(shí)間點(diǎn)不著色。與control組相比,在0min、30min、1h、3h、6h、12h時(shí)間點(diǎn)GLT-1b mRNA表達(dá)的平均光密度、陽(yáng)性標(biāo)記物總面積均明顯升高(P<0.05);其余時(shí)間點(diǎn)GLT-1b mRNA表達(dá)的平均光密度、陽(yáng)性標(biāo)記物總面積均無(wú)明顯差異。
   CIP組神經(jīng)元著色進(jìn)一步加深,以3h、6h

12、、12h較為突出,多數(shù)神經(jīng)元幾乎呈均勻一致的棕色,胞核與胞漿的界限不清;2d時(shí)間點(diǎn),胞漿著色仍較深,但胞核基本不著色;此后神經(jīng)元著色逐漸變淺。與sham組相比,GLT-1b mRNA表達(dá)的平均光密度在1h、3h、6h、12h、1d、2d時(shí)明顯升高,陽(yáng)性標(biāo)記物總面積在3h、6h、12h、1d、2d明顯升高,其余時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異。
   II組早期CA1區(qū)錐體神經(jīng)元形態(tài)無(wú)明顯改變,但神經(jīng)元染色逐漸變淺;5d、7d 時(shí),錐體神經(jīng)元幾乎

13、完全消失,在錐體神經(jīng)元區(qū)出現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞侵潤(rùn),該細(xì)胞較神經(jīng)元體積小,呈圓形,染為棕色。與sham組相比,GLT-1b mRNA表達(dá)的平均光密度、陽(yáng)性標(biāo)記物總面積在12h、1d、2d時(shí)均明顯降低。
   CIP+II組,早期神經(jīng)元染色明顯加深,胞核與胞漿的界限不清,在3h時(shí)間點(diǎn)最為突出;2d時(shí)神經(jīng)元染色以胞漿著色為主;此后神經(jīng)元著色逐漸變淺。與II組相比,GLT-1b mRNA表達(dá)的平均光密度、陽(yáng)性標(biāo)記物總面積均明顯升高。
  

14、 3 RT-PCR法觀察GLT-1b mRNA在大鼠海馬CA1區(qū)的表達(dá)數(shù)量
   Control組大鼠海馬GLT-1b mRNA有一定量表達(dá)。
   0min、30min時(shí)間點(diǎn):sham組與control組相比明顯升高;CIP組和II組與sham組相比無(wú)明顯差異;CIP+II組與II組相比明顯升高。
   1h、3h時(shí)間點(diǎn):sham組與control組相比明顯升高(p<0.05);CIP組與sham組相比明顯升

15、高(p<0.05);II組與sham組相比略有降低,但差異無(wú)顯著性(P>0.05);CIP+II組與II組相比明顯升高(p<0.05)。
   6h時(shí)間點(diǎn):sham組與control組相比明顯升高(p<0.05);CIP組與sham組相比明顯升高(p<0.05);II組與sham組相比無(wú)明顯差異 (p>0.05);CIP+II組與II組相比明顯升高(p<0.05)。
   12h、1d時(shí)間點(diǎn):sham組與control組

16、相比明顯升高(p<0.05);CIP組與sham組相比明顯升高(p<0.05);II組與sham組及CIP組相比均明顯降低(p<0.05);CIP+II組與II組相比明顯升高(p<0.05)。
   2d時(shí)間點(diǎn):sham組與control組相比無(wú)明顯差異(p>0.05);CIP組與sham組相比明顯升高(p<0.05);II組與sham組及CIP組相比均明顯降低(p<0.05);CIP+II組與II組相比明顯升高(p<0.05)

17、。
   3d、5d、7d時(shí)間點(diǎn):sham組與control組相比無(wú)明顯差異(p>0.05);CIP組與sham組相比無(wú)明顯差異(p>0.05);II組與sham組及CIP組相比均明顯降低(p<0.05);CIP+II組與II組相比均明顯升高(p<0.05)。
   結(jié)論:
   1 8 min全腦缺血可以導(dǎo)致大鼠海馬CA1區(qū)大量錐體神經(jīng)元發(fā)生明顯DND,而提前2天的3 min缺血預(yù)處理可以保護(hù)錐體神經(jīng)元,使其能

18、夠耐受通常會(huì)引起明顯DND的8 min損傷性缺血。
   2 原位雜交顯示,缺血預(yù)處理可使大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元GLT-1b mRNA表達(dá)增多;RT-PCR顯示,缺血預(yù)處理可使大鼠海馬CA1區(qū)GLT-1b mRNA表達(dá)數(shù)量明顯增多。該變化可能保護(hù)錐體神經(jīng)元使其能夠耐受隨后的損傷性缺血打擊,參與缺血預(yù)處理的腦保護(hù)作用。
   3 CIP+II組與II組相比,原位雜交顯示大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元GLT-1b mRNA表

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論