缺氧缺血性腦損傷新生大鼠HIF-1α的表達(dá)和參麥的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本試驗(yàn)以HIBD新生大鼠模型為研究對(duì)象，通過(guò)測(cè)定HIBD后14d各組新生大鼠體重增長(zhǎng)率的變化，不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡率、Bcl-2、Bax、HIF-1αmRNA表達(dá)的變化，探討參麥注射液(SMI)對(duì)HIBD新生大鼠的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。 方法：將新生7日齡 Sprague-Dawllcy(Sp)大鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組(S)、SMI 預(yù)處理組(P)、SMI治療組(SM)、生理鹽水對(duì)照組(C)。每組按術(shù)后觀察時(shí)聞點(diǎn)不同進(jìn)一步

2、分為HI后2h、12h、24h、3d、7d、14d、28d 7個(gè)亞組。把實(shí)驗(yàn)分成四部分：1．HI對(duì)新生大鼠體重增長(zhǎng)率的影響及SMI的干預(yù)作用。2．流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)(Annexin V/FITC雙染色法)HI對(duì)新生大鼠右側(cè)海馬神經(jīng)元凋亡率的影響及SMI的干預(yù)作用。3．免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)HI對(duì)新生大鼠右側(cè)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響及SMI的干預(yù)作用。4．RT-PCR法檢測(cè)HI后新生大鼠右側(cè)大腦HIF-1amRNA．的

3、表達(dá)情況及SMI的干預(yù)作用。 結(jié)果： 1．HI后14d各組新生大鼠體重增長(zhǎng)率統(tǒng)計(jì)結(jié)果：C組、SM組、P組體重增長(zhǎng)率與S組相比有差異(P<0.05)，C組、SM組和P組體重增長(zhǎng)率間比較無(wú)差異(P>0.05)。 2．HI后神經(jīng)細(xì)胞凋亡率統(tǒng)計(jì)結(jié)果：HI后2h P組、SM組、C組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率已有升高，24h達(dá)到高峰，3d開始下降，14d各組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率間比較無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM組、C組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率在H

4、I后2h、12h、24h、3d、7d觀察點(diǎn)與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率在14d、28d觀察點(diǎn)與S組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率在HI后12h、24h、3d、7d觀察點(diǎn)與C組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率在HI后2h、14d、28d觀察點(diǎn)與C組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組與SM組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率在HI后各觀察點(diǎn)比較無(wú)差異(

5、P>0.05)。 3．HI后Bcl-2蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)結(jié)果：HI后2hP組、SM組、C組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bel-2蛋白表達(dá)已有升高，24h達(dá)到高峰，14d各組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)比較無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM組、C組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)在HI后2h、12h、24h、3d、7d觀察點(diǎn)與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)在

6、HI后14d、28d觀察點(diǎn)與S組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)在HI后24h、3d,7d觀察點(diǎn)與C組比較，Bcl-2蛋白表達(dá)較C組高，有差異(P<0.05，P<0.01，)，P組、SM組右側(cè)大腦海馬、CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)在HI后2h,14d、28d觀察點(diǎn)與C組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組與SM組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)BcI-2蛋白表達(dá)在HI后各觀察點(diǎn)比較無(wú)差異(P>0.05)。

7、 4．HI后Bax蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)結(jié)果：HI后2h P組、SM組、C組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)已有升高，24h達(dá)到高峰，14d各組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。P組、SM組、C組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)在HI后2h、12h、24h,3d、7d觀察點(diǎn)與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)在HI后14d、28d觀察點(diǎn)與S組比較

8、無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)在HI后12h、24h、3d、7d觀察點(diǎn)與C組比較，Bax蛋白表達(dá)較C組降低，有差異(P<0.05，P<0.0d)，P組、SM組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)在HI后2h、14d、28d觀察點(diǎn)與C組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組與SM組右側(cè)大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達(dá)在HI后各觀察點(diǎn)比較無(wú)差異(P>0.05)。 5．HI后HIF-1αmRNA表達(dá)統(tǒng)計(jì)結(jié)

9、果：HI后2h P組、SM組、C組右側(cè)大腦HIF-1αmRNA表達(dá)已有升高，24h達(dá)到高峰，14d各組右側(cè)大腦HIF-1α表達(dá)無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM組、C組右側(cè)大腦HIF-1αmRNA表達(dá)在HI后2h、12h、24h、3d、7d觀察點(diǎn)與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組右側(cè)大腦HIF-1αmRNA表達(dá)在HI后14d、28d觀察點(diǎn)與S組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組、SM右側(cè)大腦HIF-1 αm

10、RNA表達(dá)在HI后12h、24h、3d、7d觀察點(diǎn)與C組比較，HIF-1αmRNA 表達(dá)較C組高，有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組右側(cè)大腦HIF-1 αmRNA表達(dá)在HI后2h、14d、28d觀察點(diǎn)與C組比較無(wú)差異(P>0.05)。P組與SM組右側(cè)大腦HIF-1 αmRNA表表在HI后各觀察點(diǎn)比較無(wú)差異(P>0.05)。 結(jié)論：(1) HI后新生大鼠體重增長(zhǎng)較慢，SMI對(duì)HI后新生大鼠體重增長(zhǎng)無(wú)顯著影響。(2)