Toll樣受體4的表達(dá)及miR-TLR4干擾對(duì)HBV相關(guān)肝癌細(xì)胞的生物學(xué)活性影響.pdf

1、目的:
　　觀察Toll樣受體4在乙肝病毒相關(guān)肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)及對(duì)其生物學(xué)活性的影響。
　　方法:
　　1、Western blot檢測(cè)Hep3B、HepG2.2.15、HepG2、SMMC7721及Huh7五種肝癌細(xì)胞中TLR4蛋白表達(dá)情況，選擇TLR4表達(dá)高的HBV陽性肝癌細(xì)胞作為研究對(duì)象。
　　2、構(gòu)建4個(gè)miR-TLR4質(zhì)粒和一個(gè)陰性對(duì)照質(zhì)粒，選擇干擾效果明顯的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染TLR4表達(dá)高的HBV陽性肝癌細(xì)胞

2、。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組，陰性對(duì)照組，干擾質(zhì)粒3組及干擾質(zhì)粒4組。通過MTT比色法、克隆平板形成實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)干擾TLR4表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影響。
　　結(jié)果:
　　1、TLR4基因在五種肝癌細(xì)胞株中均有表達(dá)，在Hep3B細(xì)胞中表達(dá)最高，其次是SMMC7721、HepG2.2.15和HepG2細(xì)胞，而在Huh7細(xì)胞中表達(dá)最低。
　　2、與正常組和陰性對(duì)照組相比，干擾TLR4表達(dá)后，Hep3B