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文檔簡介
1、目的:腎小管間質(zhì)炎癥(TII)是慢性腎臟疾病導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化(TIF)形成的關(guān)鍵因素。蛋白尿作為一種重要的腎臟毒素,在促發(fā)小管間質(zhì)炎癥和纖維化過程中有著重要影響。本研究通過構(gòu)建蛋白負荷腎病大鼠模型,觀察FTY720這一新型免疫抑制劑對蛋白負荷腎病大鼠腎小管間質(zhì)炎癥反應(yīng)的作用,為臨床防治腎小管間質(zhì)炎癥和纖維化發(fā)生提供新的治療靶點。
方法: SPF級雄性Wistar大鼠經(jīng)右側(cè)腎切除且適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機分為三組。生理鹽水對照組(
2、8只):經(jīng)大鼠腹腔注射與BSA等體積的生理鹽水;蛋白負荷腎病模型(AO)組(10只):經(jīng)大鼠腹腔注射牛血清白蛋白(BSA,5g/kg/d); FTY720干預(yù)組(10只):經(jīng)大鼠腹腔注射BSA(5g/kg/d)的同時給予大鼠灌胃FTY720(0.5mg/kg/d)。留取第0、2、5、7、9周各組大鼠24h尿液;于實驗第9周,處死各組大鼠并留取血、腎組織標本,血常規(guī)檢測各組大鼠外周血標本中炎癥細胞的變化情況,免疫組化檢測腎間質(zhì)中炎癥細胞的
3、分類情況,Western blot及Real-time PCR觀察各組大鼠腎臟組織中炎癥因子及Sphk1信號通路相關(guān)因子的表達。
結(jié)果:與生理鹽水對照組相比,AO組大鼠的24h蛋白尿量顯著增加(p<0.05)并在第7周達最高峰,F(xiàn)TY720用藥組大鼠24h尿蛋白量較AO組明顯緩解(p<0.05)。AO組大鼠外周血中淋巴細胞的數(shù)量顯著高于對照組(p<0.05),F(xiàn)TY720干預(yù)明顯降低大鼠外周血中淋巴細胞的數(shù)量(p<0.05)。
4、PAS染色顯示AO組大鼠腎小管出現(xiàn)擴張或萎縮,間質(zhì)炎性細胞浸潤明顯;FTY720用藥組腎小管病變明顯減輕。免疫組化顯示AO組大鼠腎間質(zhì)炎癥部位中炎癥細胞主要包括巨噬細胞、巨噬細胞分類(M1型和M2型巨噬細胞)、T淋巴細胞和B淋巴細胞均高于對照組,且Sphk1信號通路相關(guān)因子,包括Sphk1、S1Pr1及S1Pr3的表達也明顯升高,經(jīng)FTY720干預(yù)后,各炎癥細胞的數(shù)目及Sphk1信號通路相關(guān)因子的表達顯著降低。AO組大鼠腎組織中MCP-
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