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1、目的:通過研究在不同濃度蒙藥巴特日作用下,胃癌MGC-803細(xì)胞內(nèi)端粒酶表達(dá)變化,探討蒙藥巴特日抑制腫瘤生長是否與端粒酶活性有關(guān)。為其臨床應(yīng)用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:將蒙藥巴特日以細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋至終濃度,分別處理體外培養(yǎng)的人胃癌MGC-803細(xì)胞株,采用細(xì)胞毒敏感性實(shí)驗(yàn)MTT法檢測(cè)蒙藥巴特日對(duì)人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長抑制作用;采用端粒重復(fù)擴(kuò)增-銀染法(TRAP-銀染法)測(cè)定端粒酶活性;采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-
2、PCR)法觀察端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶hTERT、基因的表達(dá)。 結(jié)果: (1)MTT結(jié)果顯示,蒙藥巴特日可明顯抑制胃癌MGC-803細(xì)胞的生長,與對(duì)照組相比其生長抑制率有顯著性差異 (P<0.05)其IC50為1mg/ml。 (2)胃癌MGC-803細(xì)胞分別給予蒙藥巴特日濃度為0.3 mg/ml(a組),0.5mg/ml(b組),1mg/ml(c組),1.25mg/ml(d組),2.5mg/ml(e組),空白對(duì)照(f組)作
3、用48小時(shí)后,隨著藥物濃度的增加,端粒酶活性陽性表達(dá)呈下降趨勢(shì)。 (3)RT-PCR結(jié)果顯示,不同濃度蒙藥巴特日處理細(xì)胞48h后,hTERTmRNA表達(dá)與對(duì)照組相比明顯降低(P<0.05)。 結(jié)論: 1.蒙藥巴特日可明顯抑制胃癌MGC-803細(xì)胞的生長,其IC50為1mg/ml。 2.蒙藥巴特日能下調(diào)胃癌MGC-803細(xì)胞端粒酶活性,且有劑量依賴性。 3.蒙藥巴特日能下調(diào)胃癌MGC-803細(xì)胞hT
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