馬鈴薯抗晚疫病基因R10的高分辨率遺傳圖譜構(gòu)建.pdf

1、馬鈴薯(SolanumtuberosumL.)是世界上第四大糧食作物，種植面積僅次于水稻、小麥和玉米，同時也是菜、飼、加工兼用及工業(yè)原料作物，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和人民生活中均占有重要地位。而晚疫病是馬鈴薯生產(chǎn)的一種毀滅性病害，在全球范圍內(nèi)絕大多數(shù)栽培馬鈴薯的地區(qū)廣泛傳播。其危害性、防治難度及對社會影響已超過了水稻稻瘟病和小麥銹病被視為國際第一大作物病害?？寺】共』颍瑢崿F(xiàn)田間抗病基因的多態(tài)性是目前馬鈴薯抗晚疫病的一種可行方法。由于馬鈴薯抗晚疫病

2、基因R10抗譜廣，應(yīng)用價值大，所以常用于馬鈴薯抗病雜交育種。 本實驗以只含馬鈴薯抗晚疫病基因R10的四倍體馬鈴薯鑒別寄主3681ad(MaR10)和不含已知抗病基因的四倍體馬鈴薯栽培種Katahdin(Kat)及其雜交F1代為研究材料。對其進(jìn)行了晚疫病接種鑒定，并分別提取了基因組DNA。利用比較基因組學(xué)原理，采用BSA和CAPS、AFLP標(biāo)記相結(jié)合的技術(shù)開發(fā)出與R10基因連鎖的標(biāo)記，構(gòu)建了馬鈴薯抗晚疫病主效基因R10的高分辨率遺

3、傳圖譜。實驗取得了如下結(jié)果： 1、通過對195株F1代單株進(jìn)行抗病性鑒定，結(jié)果表明有92株表現(xiàn)抗病，100株表現(xiàn)感病，病情指數(shù)為2、3和4的植株分別只有1株，病情指數(shù)1和5的植株數(shù)比例基本符合孟德爾的1:1分離比x2=0.26:p≥0.5)，分離群體出現(xiàn)明顯的抗感兩極分化，表明R10是一個主效基因，而抗感病植株數(shù)目符合1:1比例，說明R10又是一個單拷貝基因(R10r10r10r10)。 2、通過對MLB位點分析。發(fā)現(xiàn)該

4、位點已知的各單倍型基因具有保守結(jié)構(gòu)域，屬于同一R3a基因家族。將R3a和源于MLB位點的R3a同源序列的信息進(jìn)行比對，根據(jù)它們高度保守的區(qū)域設(shè)計引物，獲得與R10基因連鎖的R3a基因的抗病基因同源序列，最終獲得兩個與R10基因連鎖的RGA標(biāo)記，距離R10基因0.36cM。 3、構(gòu)建了馬鈴薯抗晚疫病主效基因R10的高分辨率遺傳圖譜。其中包含與R10基因連鎖的6個PCR標(biāo)記和9個AFLP標(biāo)記，并將R10定位在1001T和656T兩個