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文檔簡介
1、目的:研究海洋微生物Haloroselhnia sp.(NO.1403)代謝產物1403-B的溶解貯存方法,檢測1403-B對多種腫瘤細胞的抑制作用,發(fā)現對1403-B作用敏感的腫瘤細胞株,初步探討海洋來源的醌類藥物1403-B抗腫瘤的機制。
方法:在研究1403-B藥物溶解貯存方法的基礎上,用2.5μmol/L,5.0μmol/L,10μmol/L,20μmol/L和40μmol/L的1403-B分別處理三株鼻咽癌細胞(CN
2、E-2、5-8F、HONE-l),兩株肝癌細胞(HepG2、Be17402),肺癌細胞(A549),前列腺癌細胞(PC3),視網膜母細胞瘤(Rb),胃癌細胞(SGC7901)和正常細胞人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)后MTT法檢測各細胞的存活狀態(tài);熒光顯微鏡觀察1403-B作用SGC7901后細胞形態(tài)學變化,用流式細胞儀分析其凋亡情況,Westernblotting法檢測凋亡相關因子(Caspase-3)的切割。
結果:MTT結
3、果顯示1403-B的最佳溶解貯存方式為直接用溶劑DMSO配制50mmol/L貯存液,其對正常細胞HUVEC的半數抑制濃度(IC50)為22.64±0.62μmol/L,而對多種腫瘤細胞呈濃度依賴性抑制(P<0.05),其中對胃癌細胞SGC7901的IC50最低,為4.12±0.57μmol/L。1403-B作用SGC7901細胞24h后,熒光顯微鏡下見細胞核皺縮,染色質濃集,形成凋亡小體等凋亡現象且呈劑量依賴性增加。流式細胞檢測結果表明
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