菖蒲合歡沖劑干預(yù)睡眠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、1.目的 菖蒲合歡沖劑是著名中醫(yī)藥學(xué)家程士德教授的臨床經(jīng)驗(yàn)方，具有開竅化痰，安神解郁，平肝疏肝之功效。針對現(xiàn)代人生活節(jié)奏快，精神緊張，易導(dǎo)致肝郁化火，痰熱內(nèi)擾引起失眠的特點(diǎn)，導(dǎo)師蘇晶教授臨床應(yīng)用菖蒲合歡沖劑加減治療，取得了良好的療效，為菖蒲合歡沖劑的實(shí)驗(yàn)研究奠定了臨床基礎(chǔ)。本課題以菖蒲合歡沖劑為載體進(jìn)行失眠的實(shí)驗(yàn)研究，在中醫(yī)理、法、方、藥理論指導(dǎo)下，結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)方法，探討中醫(yī)有關(guān)失眠的機(jī)理及菖蒲合歡沖劑治療失眠的作用機(jī)理，以豐富

2、和完善中醫(yī)藥治療失眠的方法與手段，為失眠的治療提供理論與臨床依據(jù)。 2.方法 首先，本研究通過對失眠現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、中醫(yī)古代文獻(xiàn)、現(xiàn)代中醫(yī)臨床，以及中醫(yī)藥治療失眠的實(shí)驗(yàn)研究等文獻(xiàn)的分析整理，對相關(guān)理論進(jìn)行總結(jié)、研究，探討了關(guān)于睡眠機(jī)制，及失眠的機(jī)制、治療等發(fā)展情況，為實(shí)驗(yàn)研究提供理論指導(dǎo)。 實(shí)驗(yàn)研究以菖蒲合歡沖劑為載體對小鼠睡眠進(jìn)行干預(yù)。實(shí)驗(yàn)研究分為四部分：實(shí)驗(yàn)一，檢測菖蒲合歡沖劑對小鼠中樞神經(jīng)遞質(zhì)的影響；實(shí)驗(yàn)二，觀察

3、菖蒲合歡沖劑對小鼠自主活動的影響；實(shí)驗(yàn)三，觀察菖蒲合歡沖劑對小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量協(xié)同作用的影響；實(shí)驗(yàn)四，觀察菖蒲合歡沖劑對小鼠戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時間的影響。 實(shí)驗(yàn)一，km小鼠21只，隨機(jī)分為3組：生理鹽水組、安定對照組、菖蒲合歡沖劑組。每組7只。分別給予0.25ml/10g生理鹽水，ig；1mg/kg安定，ig；2.5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig。連續(xù)給藥7天。取材后，采用高效液相電化學(xué)法檢測小鼠腦部單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量，用統(tǒng)計

4、學(xué)方法比較各組含量差異。實(shí)驗(yàn)二km小鼠40只，隨機(jī)分為四組，每組10只：生理鹽水組、安定對照組、菖蒲合歡沖劑低、高劑量組。給藥前把小鼠投入動物活動箱中適應(yīng)5分鐘后，按曠野法記錄2min內(nèi)小鼠行走格數(shù)作為正常值。然后分別給予0.25ml/10g生理鹽水，ig；1mg/kg安定，ig；2.5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig；5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig。各組小鼠于給藥后60min，按同法測定小鼠2min內(nèi)行走格數(shù)。用統(tǒng)計學(xué)方法比較各組行走格數(shù)差異

5、。實(shí)驗(yàn)三，km小鼠56只，隨機(jī)分為3組，每組14只：生理鹽水組、安定組、菖蒲合歡沖劑低、高劑量組。分別給予0.25ml/10g生理鹽水，ig；1mg/kg安定，ig；2.5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig；5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig。每天一次，連續(xù)給藥7天。末次給藥60min后，每組小鼠分別給予戊巴比妥鈉37mg/kg，ip。記錄注射后15min內(nèi)小鼠翻正反射消失達(dá)1分鐘以上的鼠數(shù)為睡眠動物數(shù)，以測小鼠睡眠發(fā)生率。采用統(tǒng)計學(xué)方法比較各組入睡

6、率差異。實(shí)驗(yàn)四，km小鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只：生理鹽水組、安定對照組、菖蒲合歡沖劑低、高劑量組。分別給予0.25ml/10g生理鹽水，ig；1mg/kg安定，ig；2.5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig；5g/kg菖蒲合歡沖劑，ig。每天一次，連續(xù)給藥7天。末次給藥60min后，每組小鼠分別給予戊巴比妥鈉42mg/kg，ip。記錄注射后，小鼠的睡眠時間(以翻正反射消失為入睡時間，從翻正反射消失至恢復(fù)時間為睡眠持續(xù)時間)，采用統(tǒng)計學(xué)

7、方法比較各組睡眠潛伏期及睡眠持續(xù)時間的差異。 3.結(jié)果 實(shí)驗(yàn)一：安定組和中藥組小鼠間腦、腦干部位5-HT含量較生理鹽水組均增加，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)；安定組和中藥組小鼠5-HT的產(chǎn)物5-HIAA含量也較生理鹽水組增加，但只有安定組有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)；安定組和中藥組小鼠NE含量較生理鹽水組減少，但只有安定組有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)；安定組和中藥組DA含量低于生理鹽水組，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)

8、。實(shí)驗(yàn)二：與生理鹽水組比較，安定組、菖蒲合歡沖劑低、高計量組小鼠明顯抑制小鼠自主活動，中藥灌胃后，2min內(nèi)走動格數(shù)明顯比生理鹽水組減少(P＜0.01)；菖蒲合歡沖劑低劑量組與生理鹽水組差異顯著(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)三：與生理鹽水組比較，菖蒲合歡沖劑高劑量組及安定組增加了戊巴比妥鈉小鼠入睡率，且有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。菖蒲合歡沖劑低劑量組增加了戊巴比妥鈉小鼠入睡率，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。從以上結(jié)果可以看出，菖蒲合歡沖劑可

9、以增加戊巴比妥鈉小鼠入睡率，但低劑量效果不明顯。實(shí)驗(yàn)四：菖蒲合歡沖劑高劑量組及安定組睡眠潛伏期縮短，較生理鹽水組有顯著差異(P＜0.01)；菖蒲合歡沖劑低、高計量組及安定組睡眠持續(xù)時間較生理鹽水組增長，且有統(tǒng)計學(xué)意義(低劑量組P＜0.05，高計量組P＜0.01)，高劑量組睡眠持續(xù)時間較低劑量組長，且有顯著差異(P＜0.05)。以上結(jié)果說明，中藥菖蒲合歡沖劑可以明顯縮短戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期，加速小鼠入睡時間，并延長小鼠睡眠持續(xù)時間，且

10、延長程度與中藥劑量多少有關(guān)。 4.結(jié)論 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菖蒲合歡沖劑和安定一樣具有明顯的催眠鎮(zhèn)靜作用，并能抑制小鼠自主活動。在入睡潛伏時間上，安定組與菖蒲合歡沖劑高劑量組都能縮短潛伏期，對睡眠持續(xù)時間，菖蒲合歡沖劑高劑量組作用明顯高于菖蒲合歡沖劑低劑量組，安定組和低劑量組都能延長睡眠持續(xù)時間。這說明，菖蒲合歡沖劑是改善睡眠作用的有效方劑。從而證明了我們從病因病機(jī)出發(fā)，以開竅化痰，安神解郁，平肝潛陽作為立題依據(jù)的正確性。本實(shí)