基于溫散法的肝積散抗肝纖維化的機理研究.pdf

1、目的：研究中醫(yī)古典理論“五積”中“肝積”、“脾積”與肝纖維化的相關(guān)性，提出“溫散”的中醫(yī)康復法則，在古方基礎(chǔ)上創(chuàng)制方藥“肝積散”。通過實驗研究，觀察肝積散對肝纖維化大鼠肝細胞酶、血清肝纖維化標志物、抗脂質(zhì)過氧化、肝星狀細胞及細胞因子的影響，探討基于溫散法的肝積散抗肝纖維化的作用機理。
　　 方法：用Wister雄性大鼠102只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機分為2組，分別為正常對照組12只、造模組90只。
　　 造模組腹腔注射40

2、％的四氯化碳石蠟油造模劑，首次0.5ml/100g體重，之后每次為0.3ml/100g體重，每周2次，正常對照組注射等量0.9%氯化鈉注射液。進行4周造模之后改為每周1次，再進行8周，共進行12周。造模并以10%的酒精作為以上造模組的唯一飲料，正常對照組給以生理鹽水。造模4周之后隨機抽取造模組中10只處死，證實肝纖維化模型已經(jīng)建立成功之后的60只大鼠分為正常對照組、模型組、秋水仙堿片組、肝積散低劑量組、肝積散中劑量組、肝積散高劑量組，并

3、開始進行灌胃給藥治療。具體方法：模型組和正常對照組給予蒸餾水1.5ml/100g體重，秋水仙堿片組按每只0.01mg/100g，肝積散低劑量治療組給予中藥復方0.05g/200g，中劑量治療組給予中藥復方0.1g/200g，高劑量治療組給予中藥復方0.2g/200g，共治療8周。
　　 治療8周后，眼球后取血后處死大鼠。統(tǒng)一留取大鼠肝右葉標本置于10%甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色。
　　 結(jié)果：根據(jù)病理組織切

4、片所示，本研究所有造模大鼠肝臟均可見不同程度的肝細胞水樣變性和脂肪變性、纖維結(jié)締組織增生、炎細胞浸潤，表明本研究造模成功。模型組大鼠肝組織炎癥和纖維化程度較正常組明顯增高(P＜0.01)；血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、丙二醛(MDA)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、肝組織結(jié)締組織生長因子(CTGF)、金屬蛋白酶組織抑制因子-1（TIMP-1）

5、、CTGFmRNA、TIMP-1mRNA、肝星狀細胞大麻素受體CB1和CB2、活化的肝星狀細胞的表達均較正常組明顯增高(P＜0.05，P＜0.01)；血清中超氧化物歧化酶(SOD)較正常組明顯降低(P＜0.01)。
　　 用肝積散高、中、低劑量治療后，大鼠肝組織炎癥和纖維化程度較模型組明顯減輕(P＜0.05.P＜0.01)；血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前

6、膠原(PCⅢ)、丙二醛(MDA)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、肝組織結(jié)締組織生長因子(CTGF)、金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)、CTGFmRNA、TIMP-1mRNA、肝星狀細胞大麻素受體CB1、活化的肝星狀細胞的表達均較模型組明顯降低(P＜0.05，P＜0.01)；血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和肝星狀細胞大麻素受體CB2較模型組明顯升高(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：基于溫散法的肝積散能夠下調(diào)肝纖維