FOXM1在肺癌組織中表達(dá)及其分子致癌機(jī)制.pdf

1、目的：研究肺癌組織中FOXM1表達(dá)與其預(yù)后的關(guān)系，構(gòu)建FOXM1報(bào)告基因并通過多種方法研究肺癌細(xì)胞株中FOXM1表達(dá)情況及其作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1．采用PCR法獲得目的基因并與空載體連接構(gòu)建報(bào)告基因；
　　 2．采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)80例肺癌組織中FOXM1、KI—67的表達(dá)水平，并收集病例臨床資料，分析FOXM1、KI—67表達(dá)水平與生存時(shí)間的關(guān)系；
　　 3．采用免疫熒光法研究吉非替尼對(duì)

2、FOXM1的影響；
　　 4．采用western blotting、real—time PCR和轉(zhuǎn)染研究細(xì)胞中FOXM1表達(dá)水平；
　　 5．FOXM1報(bào)告基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞，通過檢測(cè)報(bào)告基因熒光強(qiáng)度，研究尼古丁對(duì)FOXM1的影響；
　　 6．癌基因c—myc、β—catenin、AKT、抑癌基因RasN17、EP300同F(xiàn)OXM1報(bào)告基因共轉(zhuǎn)染，研究其對(duì)FOXM1表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1．

3、80例癌組織中，KI—67強(qiáng)陽性率61．25％，弱陽性率26．25％，陰性率12．50％。FOXM1強(qiáng)陽性率66．25％，弱陽性率25．00％，陰性率8．75％。兩者呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)=0．437。非吸煙組中FOXM1低表達(dá)者生存時(shí)間比高表達(dá)者長(zhǎng)，x2=4．439，P=0．035。吸煙組中FOXM1低表達(dá)者生存時(shí)間比高表達(dá)者短，x2=4．613，P=0．032；
　　 2．轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)?zāi)峁哦〗M比對(duì)照組熒光強(qiáng)；
　　 3．re

4、al—time PCR、western blotting和轉(zhuǎn)染表明癌細(xì)胞中有FOXM1表達(dá)；
　　 4．PC9/AB2細(xì)胞中FOXM1與CCNB1表達(dá)比例異常；
　　 5．免疫熒光實(shí)驗(yàn)吉非替尼組FOXM1熒光強(qiáng)度比對(duì)照組弱；
　　 6．共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，相對(duì)于對(duì)照組，F(xiàn)OXM1報(bào)告基因與癌基因共轉(zhuǎn)染組熒光強(qiáng)，與抑癌基因共轉(zhuǎn)染組熒光弱。
　　 結(jié)論：
　　 1．FOXM1在肺癌組織及細(xì)胞中高表達(dá)且與不良預(yù)