室內(nèi)環(huán)境污染在兒童白血病發(fā)病中的基因-環(huán)境交互作用研究.pdf

1、在我國，室內(nèi)裝修是導(dǎo)致室內(nèi)空氣污染的重要原因，其與兒童白血病之間的關(guān)系越來越受到人們的關(guān)注。借助多數(shù)其他腫瘤的研究方法，白血病產(chǎn)生的機(jī)制很可能涉及基因-環(huán)境交互作用。目前，關(guān)于室內(nèi)環(huán)境因素與兒童白血病基因-環(huán)境交互作用的研究較少。本研究在候選和驗(yàn)證的兒童白血病環(huán)境易感基因的基礎(chǔ)上，采用病例-對(duì)照研究，通過問卷調(diào)查和現(xiàn)場檢測評(píng)估病例與對(duì)照室內(nèi)環(huán)境污染物的暴露，分析基因單核苷酸多態(tài)性(SNPs)位點(diǎn)和可能的單體型在疾病和對(duì)照的分布及與兒童白

2、血病的關(guān)聯(lián)；采用單純病例研究探討易感基因多態(tài)性與環(huán)境因素在兒童白血病發(fā)病中的交互作用；通過檢測病例與對(duì)照組尿DNA損傷產(chǎn)物8-OHdG和尿微量元素水平，及探討之間的可能關(guān)系，為研究環(huán)境危險(xiǎn)因素的作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。本課題分4個(gè)部分進(jìn)行研究： 第一部分：兒童急性白血病室內(nèi)環(huán)境危險(xiǎn)因素的流行病學(xué)研究。 目的：對(duì)兒童白血病可疑環(huán)境危險(xiǎn)因素進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查與分析，重點(diǎn)探討室內(nèi)環(huán)境因素尤其裝修因素與兒童急性白血病的關(guān)系，為兒童白血病

3、制定針對(duì)性的預(yù)防措施提供科學(xué)依據(jù)。 方法：1.采用1:1配對(duì)的病例一對(duì)照流行病學(xué)調(diào)查方法，對(duì)三家醫(yī)院(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院和復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院)2006年5月至2007年5月確診的123例兒童白血病新發(fā)病例和對(duì)照的可疑危險(xiǎn)因素進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容涉及母親妊娠期及兒童出生后的家庭裝修、家庭內(nèi)殺蟲劑使用、住宅周圍設(shè)施、X線接觸、父母吸煙和飲酒情況、父母職業(yè)、家庭經(jīng)濟(jì)狀況等50余項(xiàng)可能

4、的危險(xiǎn)因素。應(yīng)用單因素和多因素條件Logistic回歸模型相結(jié)合的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。2.對(duì)其中部分病例及對(duì)照兒童臥室內(nèi)環(huán)境污染物苯、甲醛、氨、氡、TVOCs、電磁輻射應(yīng)用便攜式儀器進(jìn)行現(xiàn)場檢測，分析病例組與對(duì)照組之間室內(nèi)環(huán)境污染物暴露水平的差異。 結(jié)果：1.在α=0.05水平上，通過多因素Logistic回歸分析篩選出冬天睡覺時(shí)門窗緊閉(OR=2.31，95％CI:1.19-4.48)、不安裝抽油煙機(jī)(OR：1.69，95％CI

5、:1.10-2.54)、室內(nèi)使用殺蟲劑(OR=1.56，95％CI:1.06-2.29)3項(xiàng)因素為兒童白血病的危險(xiǎn)因素。其中冬天睡覺時(shí)門窗緊閉者，患兒童白血病的風(fēng)險(xiǎn)是門窗全開者的2.31倍。不安裝抽油煙機(jī)者患兒童白血病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是安裝抽油煙機(jī)的1.69倍。室內(nèi)使用殺蟲劑者，患兒童白血病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是不使用殺蟲劑的1.56倍。2.家庭實(shí)測結(jié)果表明病例組甲醛、TVOCs和氡水平顯著高于對(duì)照，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：1.冬天關(guān)門窗緊

6、閉、不使用抽油煙機(jī)和室內(nèi)使用殺蟲劑3項(xiàng)因素可能是兒童白血病的危險(xiǎn)因素。2.結(jié)合病例組甲醛、總揮發(fā)性有機(jī)物(TVOCs)和氡水平顯著較對(duì)照組高，提示冬天晚上睡眠時(shí)關(guān)門窗可能導(dǎo)致甲醛、TVOCs和氡的積聚而增加兒童白血病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)果需要增加樣本量進(jìn)一步研究進(jìn)行證實(shí)。 第二部分：基因單核苷酸多態(tài)性與兒童急性白血病易感性關(guān)系的研究。 目的：探討基因SNPs和兒童白血病易感性的關(guān)系，以及基因與基因間的交互作用。 方法：

7、在第一部分病例一對(duì)照研究的基礎(chǔ)上，應(yīng)用MassARRAYsystem對(duì)123對(duì)病例與對(duì)照組兒童外周血DNA的CYP1A1、CYP2E1、GSTP1、GSTM1null、GSTT1null、NQO1、NAT2、MTHFR、ALDH2、hMLH1、APEX(APEX1)、MGMT、XRCC1、XPD(ERCC2)、hOGG1、AHR和P53基因進(jìn)行SNPs檢測，分析基因型頻率在病例組與對(duì)照組的分布差異：采用單純病例設(shè)計(jì)研究基因與基因間的交互

8、作用。 結(jié)果：1.應(yīng)用卡方檢驗(yàn)篩檢出GSTT1null、CYP2E1、MGMT可能是兒童白血病的易感基因。攜帶GSTT1null缺失型(OR=2.76，95％CI：1.43-5.33)，CYP2E1-1294G＞C突變型(OR=1.91，95％CI：1.11-3.45)，MGMTEx7+13A＞G突變型(OR=4.78，95％CI:1.01-22.58)患兒童急性白血病的風(fēng)險(xiǎn)增加。2.采用單純病例研究設(shè)計(jì)(α=0.05)，研究發(fā)

9、現(xiàn)CYP1A14889A＞G與ALDH2Exl2-12G＞A，CYP2E1-1294G＞C與GSTP1313A＞，GSTP1341C＞T、GSTT1null+＞-與XPDEx10-16G＞A，GSTP1341C＞T、MGMTEx7+13A＞G與GSTP1313A＞G，NAT2341T＞C、XPDEx10-16G＞A與XPDEx23+61T＞G突變型之間存在協(xié)同作用；同時(shí)發(fā)現(xiàn)NQO1609C＞T與MTHFR677C＞T，hOGG11245

10、C＞G與CYP1A16235T＞C突變型之間存在拮抗作用。 結(jié)論：GSTT1null缺失型、CYP2E1-1294G＞C突變型、MGMTEx7+13A＞G突變型可能與兒童急性白血病的易感性相關(guān)。基因間協(xié)同和拮抗的交互作用可能在兒童白血病發(fā)病中起重要作用，不同基因型之間的協(xié)同和拮抗作用可能決定了兒童白血病的發(fā)病基礎(chǔ)，從基因交互作用的角度進(jìn)一步探討了兒童白血病的發(fā)病機(jī)制，為進(jìn)一步通過大樣本建立兒童白血病多基因交互作用模型奠定了基礎(chǔ)。

11、 第三部分：環(huán)境危險(xiǎn)因素與兒童急性白血病基因單核苷酸多態(tài)性的交互作用研究。 目的：分析兒童白血病發(fā)病中的基因與環(huán)境因素之間的交互作用，重點(diǎn)探討室內(nèi)環(huán)境因素在兒童白血病發(fā)病中的基因-環(huán)境交互作用。 方法：采用單純病例設(shè)計(jì)，在α=0.05的水平上對(duì)123例病例通過非條件Logistic回歸分析基因與環(huán)境因素間的交互作用。 結(jié)果：1.室內(nèi)環(huán)境因素中，攜帶ALDH2Exl2-12G＞A突變基因型與臥室擺放人造板材

12、家具(OR=2.48，95％CI:1.12-5.50)及臥室電視機(jī)擺放(OR=3.24，95％CI=1.19-8.84)之間具有交互作用；GSTT1Null缺失型與使用油漆粉刷墻壁具有交互作用(OR=3.84，95％CI=1.12-13.22)。2.室外環(huán)境因素中，攜帶GSTT1Null缺失型與家庭周圍500米建有工廠之間具有交互作用(OR=3.13，95％CI=1.11-8.82)；攜帶XRCC127466G＞A突變基因型與家庭周圍5

13、00米裝有高壓變電器具有交互作用(OR=3.31，95％CI=1.25-8.73)。MGMTEx7+13A＞G突變基因型與高壓變電器具有交互作用(OR=5.74,95％CI=1.44-22.85)。 結(jié)論：室內(nèi)外環(huán)境因素與基因之間的交互作用可能在兒童白血病的發(fā)病中起重要作用。室內(nèi)環(huán)境因素中，人造板材家具與ALDH2Exl2-12A，GSTT1Null缺失型與使用油漆粉刷墻壁的交互作用可能是是發(fā)生兒童白血病的危險(xiǎn)因素。結(jié)果需要大樣

14、本量進(jìn)一步研究證實(shí)。 第四部分：兒童急性白血病尿8-OHdG水平和尿微量元素的關(guān)系研究。 目的：測定兒童急性白血病患兒尿8-OHdG和尿微量元素的水平，并探討尿8-OHdG與尿微量元素、生活方式和一些臨床指標(biāo)的關(guān)系。 方法：檢測116例急性白血病患兒(94急性淋巴細(xì)胞白血病，ALL；22例急性髓性白血病，AML)和51例對(duì)照尿8-OHdG和尿微量元素的水平。 結(jié)果：白血病患兒治療前尿8-OHdG水平較對(duì)照

15、組顯著增高(中位數(shù)：5.32vs.2.22ng/mgcreatinine，P＜0.05)。且白血病患兒尿8-OHdG水平不與性別，父母吸煙及對(duì)乙酰氨基酚服用有關(guān)，而與年齡相關(guān)。線性回歸分析顯示在年齡段＜3歲組，8-OHdG水平和尿鉻水平顯著相關(guān)(P＜0.05)，而與Zn，As及Pb有相關(guān)趨勢。在年齡段3～15歲組，線性回歸分析顯示尿8-OHdG和WBC計(jì)數(shù)及血清LDH之間顯著相關(guān)。 結(jié)論：研究提示3歲以下年幼白血病患兒可能因Cr