卵巢癌淋巴結(jié)定向轉(zhuǎn)移與非定向轉(zhuǎn)移差異性基因的分析與驗(yàn)證.pdf

1、目的：人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細(xì)胞系SKOV3及其在裸鼠體內(nèi)建立的淋巴結(jié)定向高轉(zhuǎn)移亞克隆SKOV3-pm，為卵巢癌轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的深入研究提供了細(xì)胞模型，本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)采用功能分類基因芯片技術(shù)，篩選出與卵巢癌淋巴結(jié)定向高轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的基因，為了驗(yàn)證基因芯片結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們選取了其中的integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA、PTEN九個(gè)基因，探討以上基因在卵巢癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力

2、細(xì)胞亞系的表達(dá)，以及integrinα6蛋白在卵巢惡性腫瘤組織以及不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞系表達(dá)以及臨床意義。 方法：采用TRIZOL一步法抽提卵巢癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞的總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成CDNA，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)PTEN、integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA-1九個(gè)基因在不同細(xì)胞亞系表達(dá)的灰度值，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)PTEN、integrinα6

3、、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA九個(gè)基因在不同細(xì)胞亞系的表達(dá)進(jìn)行定量分析。選取20例臨床病例，針對(duì)原發(fā)病灶、淋巴結(jié)以及不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞系進(jìn)行integrinα6免疫組化檢測(cè)，分析其與卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 結(jié)果：Integrinα6基因在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3細(xì)胞系中的表達(dá)呈上升趨勢(shì)，但在SKOV3-PM4細(xì)胞系中的表達(dá)低于SKOV3細(xì)胞系。F

4、LICE、FGF2、MTA1、Maspin、TRANSIN基因在SKOV3-PM細(xì)胞系中的表達(dá)均比Skov3細(xì)胞系中的表達(dá)要高，TIMP3、MKK4基因在SKOV3-PM細(xì)胞系中的表達(dá)均比Skov3細(xì)胞系中的表達(dá)要低，且MKK4基因表達(dá)量在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3、SKOV3-PM4細(xì)胞系呈逐漸下降趨勢(shì)，PTEN基因在SKOV3表達(dá)而在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-PM4細(xì)胞系幾乎不表達(dá)。