促紅細(xì)胞生成素對糖尿病兔心梗后心肌間質(zhì)重塑的影響.pdf

1、目的：
　　 糖尿病狀態(tài)下心肌即可發(fā)生纖維化,加之急性心肌梗死后,心臟發(fā)生心室重構(gòu)程度更加嚴(yán)重,如何減少心肌梗死周圍缺血區(qū)心肌纖維化的生成,是減輕心室重構(gòu)的重要措施。本試驗(yàn)通過觀察重組人促紅細(xì)胞生成素(EPO)對糖尿病兔心肌梗死后間質(zhì)重塑的影響,并探討促紅細(xì)胞生成素對心臟保護(hù)作用的機(jī)制。
　　 方法：
　　 40只健康日本大耳兔禁食12小時,經(jīng)耳緣靜脈采用兩次法注射四氧嘧啶(ALX),按50mg/kg,間隔1周后

2、再按100mg/kg注射ALX,注射后即刻50％葡萄糖5ml灌胃,采用葡萄糖氧化酶法測末次給藥后檢測24h,72h的空腹耳緣靜脈血血糖值,以至少一次空腹血糖≥16.7mmol/L建模成功。
　　 糖尿病模型成模并飼養(yǎng)一月存活30只,按隨機(jī)數(shù)字法分為:
　　 (1)假手術(shù)組A；
　　 9只糖尿病兔前降支穿線不結(jié)扎,給予1ml/Kg生理鹽水耳緣靜脈注射,3天后再次注射相同劑量。
　　 (2)手術(shù)對照組B；

3、r>　　 11只糖尿病兔心梗模型建立后,給予1ml/Kg生理鹽水耳緣靜脈注射,3天后再次注射相同劑量。
　　 (3)手術(shù)用藥組C；
　　 10只糖尿病兔心梗模型建立后,給予1ml/Kg生理鹽水稀釋的EPO耳緣靜脈注射稀釋濃度1000U/ml),3天后再次注射相同劑量。
　　 TTC染色檢測心肌梗死面積的變化,并圖像分析統(tǒng)計心肌梗死范圍所占面積;
　　 HE染色觀察光鏡下心肌梗死情況及梗死范圍的變化;

4、r>　　 Masson染色觀察梗死周圍心肌纖維化情況,光鏡下圖像分析計算纖維所占視野容積分?jǐn)?shù);
　　 免疫組織化學(xué)染色半定量分析心肌組織中MMP-9及Timap-1蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：
　　 糖尿病模型成功33只,觀察期間死亡3只,30只進(jìn)入心梗模型建立階段,心肌梗死后一個月3組共存活22只,A組7只;B組7只;C組8只,進(jìn)入數(shù)據(jù)統(tǒng)計。
　　 TTC染色下EPO干預(yù)組心肌梗死面積明顯小于對照組

5、(P＜0.05)。
　　 手術(shù)干預(yù)組HE染色下可見心肌梗死區(qū)纖維增生顏色發(fā)白,肌纖維排列紊亂,存在空泡變性,EPO干預(yù)組紅色心肌纖維排列規(guī)律,有較少膠原纖維滲出。
　　 Masson染色下缺血邊緣區(qū),纖維增生C組明顯低于B組(P＜0.05)。
　　 免疫組織化學(xué)染色MMP-9積分光密度值(IOD)C組明顯低于B組(P＜0.05);
　　 免疫組織化學(xué)染色Timp-1積分光密度值(IOD)B組與C組無明顯差