DWI監(jiān)測AQP4 mRNA干擾治療缺血性腦水腫的實驗研究.pdf

1、目的：探討siRNA-AQP4干擾水通道蛋白-4（AQP4）對早期缺血性腦水腫的影響與磁共振成像的關(guān)系。
　　 方法：將64只Wistar大鼠，隨機分為4組，即正常組1只、假手術(shù)組3只、對照組（采用Benses法行MCAO手術(shù)）30只和治療組（MCAO+SiRNAAQP4基底節(jié)注射）30只。將后2組再進一步分為6小組（每小組各5只），在術(shù)后15min、30min、1h、2h、4h及6h應(yīng)用DWI圖像分析技術(shù)測定缺血區(qū)面積（rs-

2、DWI）、ADC值、采用免疫組化、原位雜交、RT-PCR、WestenBlotting測定AQP4的表達水平，同時用光鏡和透射電鏡（TEM）進行對應(yīng)部位的病理觀察。
　　 結(jié)果：正常組與假手術(shù)組的MRI未見異常，腦組織無病理改變，AQP4表達無明顯變化。對照組：在缺血后15min～6h在DWI上出現(xiàn)高信號，rs-DWI在15min～1h內(nèi)快速增加，2h～6h緩慢增加；AQP4蛋白表達均見明顯增加；在1h內(nèi)增加最為迅速；治療組：在

3、缺血后15min～6h亦在DWI上出現(xiàn)高信號，隨著時間延長，rs-DWI逐漸增加，ADC值在15min開始逐漸下降，2h降至最低點后逐漸上升。治療組與對照組比較，30min～4h時間段rs-DWI、AQP4蛋白表達治療組均減少，兩組間具有明顯差異（P<0.05）。15min及6h時間點內(nèi)兩組間未見明顯差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：DWI能及時、快速、準確的反映早期缺血性腦水腫的病理過程。AQP4表達上調(diào)是缺血性膠質(zhì)細胞內(nèi)水

4、腫時rADC值下降分子基礎(chǔ)，AQP4mRNAi沉默技術(shù)能有效的抑制AQP4表達上調(diào)，減輕膠質(zhì)細胞內(nèi)水腫程度，逆轉(zhuǎn)半暗帶組織，從而縮小DWI高信號范圍。
　　 RNA干擾（RNAi）AQP4在30min～4h時間內(nèi)可以使腦組織內(nèi)AQP4mRNA及AQP4蛋白表達減少，并且在相應(yīng)時間點內(nèi)腦水腫程度減輕，對照組缺血面積較治療組缺血面積減?。≒<0.05）。15min及6h治療組缺血面積比手術(shù)組缺血面積影響未見明顯變化（P>0.05），