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1、目的:探討七氟烷對(duì)培養(yǎng)的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞中炎癥因子表達(dá)的影響。
方法:取新生(2-3天)C57BL/6小鼠,分離小膠質(zhì)細(xì)胞,將其隨機(jī)分為4組(n=10):對(duì)照組(Control);七氟烷組(Sevoflurane);NF-ΚB抑制劑組(PDTC);NF-ΚB抑制劑+七氟烷組(PDTC+Sevoflurane)。用Drager麻醉機(jī)向Sevoflurane組PDTC+Sevoflurane組培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞盒內(nèi)釋放21%O2,5%
2、CO2,4.1%七氟烷的氣體,用氣體分析儀持續(xù)監(jiān)測(cè)各組的濃度。應(yīng)用Iba-1的免疫熒光染色法對(duì)小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行純度鑒定。分別在于給七氟烷后2h、4h和6h時(shí)采用免疫印跡分析技術(shù)檢測(cè)兩組小膠質(zhì)細(xì)胞 IL-6和TNF-α的表達(dá)水平和NF-ΚB的活性。PDTC+Sevoflurane組在給七氟烷前一小時(shí)給予PDTC,采用ELISA技術(shù)和免疫印跡分析技術(shù)檢測(cè)各組小膠質(zhì)細(xì)胞IL-6和TNF-α的濃度和NF-ΚB的表達(dá)。
結(jié)果:免疫印跡
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