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文檔簡介
1、目的:探討沉默組織蛋白酶D(cathepsin D,Cath-D)對二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)抑制人胃癌MGC803細胞遷移與侵襲的影響,闡明DADS抑制胃癌遷移與侵襲的分子機制。
方法:首先通過脂質體轉染方法將Cath-D siRNA轉染進人胃癌MGC803細胞,獲得MGC803的重組細胞系;用30 mg/L的DADS處理MGC803的重組細胞系與人胃癌MGC803細胞;RT-PCR和Wes
2、tern blot檢測DADS處理前后三組細胞株(Cath-D siRNA干擾組、陰性對照組和空白對照組)中Cath-D的mRNA與蛋白表達變化;劃痕實驗和Transwell實驗分別檢測DADS處理前后三組細胞株(Cath-D siRNA干擾組、陰性對照組和空白對照組)的遷移與侵襲能力的變化。結果:沉默Cath-D后,Cath-D mRNA與蛋白的表達水平明顯下降(P<0.05),劃痕距離明顯增寬(P<0.05),穿膜細胞數(shù)明顯減少(P
3、<0.05)。DADS作用人胃癌MGC803細胞24h后,Cath-D mRNA和蛋白表達水平明顯下降(P<0.05),劃痕距離明顯增寬(P<0.05),穿膜細胞數(shù)明顯減少(P<0.05);并且,Cath-D siRNA干擾組加DADS處理后Cath-D mRNA與蛋白的表達水平下降最為明顯(P<0.05),劃痕距離最寬(P<0.05),穿膜細胞數(shù)最少(P<0.05)。
結論:
1.沉默Cath-D可抑制人胃癌MGC
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