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1、目的:檢測(cè)NHE的調(diào)控因子CHP1和CHP2的mRNA在不同胚胎發(fā)育階段的不同組織中的相對(duì)表達(dá)量,以研究它們?cè)诎l(fā)育過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律;同時(shí)在腫瘤組織中檢測(cè)CHP1和CHP2的蛋白表達(dá),以研究其蛋白表達(dá)特征。 方法:從昆明鼠母鼠(孕10日、15日、20日)及其胚胎的肝、腦、腸、心、皮、脾、腎、肺、肌等組織中提取mRNA,以β-actin基因作為內(nèi)對(duì)照,通過(guò)半定量RT-PCR檢測(cè)目標(biāo)基因表達(dá)情況;從人的多種腫瘤組織(白血病細(xì)胞、肺癌組
2、織、胃癌組織、結(jié)腸癌組織、肝癌組織、宮頸癌組織)和對(duì)照的正常人的肝臟組織中提取蛋白,并通過(guò)免疫印跡技術(shù)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:CHP1 mRNA在胚胎發(fā)育的這三個(gè)階段的所有組織中都有表達(dá),并隨胚胎發(fā)育而增強(qiáng);CHP2 mRNA僅在腸、心、腦、皮、肝、肺等組織的某些階段有少量表達(dá),表達(dá)不穩(wěn)定,表達(dá)趨勢(shì)與胚胎發(fā)育過(guò)程關(guān)系不明顯。CHP1在正常組織對(duì)照和惡性轉(zhuǎn)化組織中均有表達(dá),CHP2在惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞中表達(dá),而不在正常組織對(duì)照中表達(dá)
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