糖尿病大鼠視網(wǎng)膜GLUT1及Ang1表達(dá)的變化及相關(guān)性研究.pdf

1、糖代謝紊亂在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，而葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(GLUT1)作為調(diào)節(jié)葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞的主要載體，其基因表達(dá)及功能狀態(tài)，有可能是決定視網(wǎng)膜是否受累的因素之一。關(guān)于GLUT1在糖尿病病程中的表達(dá)變化，目前尚有爭(zhēng)議。高糖、缺氧、氧化應(yīng)激、AngiotensinⅡ、VEGF等均參與調(diào)節(jié)GLUT1的表達(dá)。最近有研究表明，Akt(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，又稱PKB)的激活可調(diào)節(jié)GLUT1的表達(dá)。Angiopoietin(A

2、ng)是最近新發(fā)現(xiàn)的血管調(diào)節(jié)因子，其中Ang1的作用有：參與新生血管生成；抑制炎癥及滲出；抑制粘附與凋亡等。在糖尿病病程中，Ang1在視網(wǎng)膜有所表達(dá)，可能參與了糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)展。已有研究證實(shí)Ang1與其受體Tie2結(jié)合后可激活A(yù)kt。綜上所述，Ang1可通過(guò)Tie2受體調(diào)節(jié)Akt的活性，而Akt又可調(diào)節(jié)GLUT1活性，那么，GLUT1與Ang1在糖尿病視網(wǎng)膜中表達(dá)部位及數(shù)量究竟如何；在糖尿病視網(wǎng)膜病變中是否有一定的作用；Ang1能

3、否通過(guò)Akt來(lái)調(diào)節(jié)GLUT1的表達(dá)，進(jìn)而影響視網(wǎng)膜的糖代謝過(guò)程?本研究將檢測(cè)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中Ang1與GLUT1的含量，并初步分析兩者之間的相關(guān)性，為臨床診斷治療提供理論依據(jù)。 材料與方法： 健康雄性Wistar大鼠40只，體重180-220g。隨機(jī)選出10只作為正常對(duì)照組(NC組)，另外30只采用鏈脲佐菌素(STZ)溶液腹腔一次性注射建立糖尿病模型(成模20只)，確定成模后隨機(jī)分為2組：糖尿病血糖未控制組(DM1組)

4、和糖尿病血糖控制組(DM2組)，每組10只。利用腹腔內(nèi)注射魚(yú)精蛋白鋅胰島素(PZI)將2個(gè)糖尿病組大鼠血糖分別控制在＞16.7mmol/L、和＜14mmol/L兩個(gè)水平。標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)3個(gè)月后取血測(cè)定糖化血紅蛋白(HbA1c)，并分離大鼠視網(wǎng)膜，利用免疫組化方法進(jìn)行GLUT1蛋白的檢測(cè)，用逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)Ang1mRNA含量。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±SD)表示，采用SPSS11.0軟件處理。

5、樣本間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，變量間的關(guān)系采用直線相關(guān)分析。P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1、實(shí)驗(yàn)期間DM1、DM2兩組糖尿病大鼠體重明顯低于NC組大鼠同期體重，而血糖和糖化血紅蛋白(HbA1c)則顯著高于NC組大鼠。 2、免疫組化染色顯示NC組大鼠視網(wǎng)膜中可見(jiàn)GLUT1陽(yáng)性染色顆粒，DM1組、DM2組大鼠視網(wǎng)膜中GLUT1陽(yáng)性染色顆粒明顯增加，且DM1組比DM2組增加更明顯。 3、RT-PCR結(jié)

6、果顯示三組大鼠視網(wǎng)膜中均含Ang1mRNA。與NC組相比，DM1組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)Ang1mRNA表達(dá)增加了107.24％，DM2組大鼠增加了46.07％，差別均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。 4、相關(guān)分析表明Ang1與GLUT1表達(dá)具有相關(guān)性，呈正相關(guān)，pearson相關(guān)系數(shù)為r=0.512(p＜0.05)。 結(jié)論： 1、糖尿病高血糖狀態(tài)下，大鼠視網(wǎng)膜中GLUT1蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組增加，尤以血糖未控制組增加明顯