bFGF及TGF-β1對(duì)鼻-鼻竇炎伴鼻息肉黏膜中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控作用.pdf

1、目的：本課題擬觀察體外堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor betel，TGF-β1）單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人鼻息肉成纖維細(xì)胞（human nasal polyps fibroblasts，NPFs)增殖及III型膠原合成的影響。
　　方法：采用組織塊原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，將取自慢性鼻竇炎伴鼻息肉患者的鼻息肉摘

2、除標(biāo)本作為來(lái)源進(jìn)行人鼻息肉成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)，使用免疫組化技術(shù)鑒定培養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源。將不同濃度的bFGF（l00ngml，50ng/ml，l0ng/ml，lng/ml四個(gè)濃度）、TGF-β1（l00ngml，50ng/ml，l0ng/ml，lng/ml四個(gè)濃度）分別作用于體外培養(yǎng)的NPFs，并將濃度均為l0ng/ml的bFGF及TGF-β1聯(lián)合作用于體外培養(yǎng)的NPFs，于第24、72、120小時(shí)采用比色法檢測(cè)活性細(xì)胞增殖情況（四唑化合物

3、（[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium，inner salt;MTS(a)]）比色法），并收集上清液采用ELISA法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中III型膠原的含量。
　　結(jié)果：（1）組織塊貼壁3天可見(jiàn)細(xì)胞向周?chē)斐觯?2天左右爬滿，免疫組化鑒定波形蛋白表達(dá)陽(yáng)性，細(xì)胞培養(yǎng)穩(wěn)定。（2）24小時(shí)后實(shí)驗(yàn)組各

4、濃度組的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞增殖的情況與對(duì)照組相比變化不明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。在72小時(shí)及120小時(shí)時(shí)，TGF-β1在1～100 ng/ml范圍內(nèi)隨濃度增加對(duì)NPFs細(xì)胞的抑制作用明顯增強(qiáng)，具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01）；bFGF在1～100 ng/ml濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)為明顯的促進(jìn)NPF細(xì)胞增殖作用，具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；濃度為10 ng/ml的TGF-β1和10ng/ml的bFGF聯(lián)合作用于人NPF，

5、產(chǎn)生較明顯的拮抗作用，與單獨(dú)作用時(shí)比較，具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。（3）當(dāng)bFGF、TGF-β1單獨(dú)及聯(lián)合左右，誘導(dǎo)NPFs增殖發(fā)生變化時(shí)，NPFs分泌的III型膠原的含量產(chǎn)生明顯的濃度差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：TGF-β1具有抑制人鼻息肉成纖維細(xì)胞增殖及III型膠原的分泌的作用，bFGF具有促進(jìn)人鼻息肉成纖維細(xì)胞增殖及 III型膠原的分泌作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)鼻息肉成纖維細(xì)胞增殖具有拮抗作用，