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1、生物相容性、降解性優(yōu)良的殼聚糖/海藻酸鹽微球載體技術(shù)成為蛋白質(zhì)藥物口服給藥系統(tǒng)發(fā)展的前沿。為了研究殼聚糖/海藻酸鈣微球在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運、吸收與分布狀況,可以采用肝、脾等組織切片及血流變測試進行定性與定量考察。但是由于殼聚糖、海藻酸鈉沒有明顯的顏色,微球在體檢測存在一定的困難。因此采用特定化合物.熒光素對微球進行標(biāo)記,通過標(biāo)準(zhǔn)儀器檢測熒光素達到對殼聚糖/海藻酸鹽微球在體檢測目的。 本文采用異硫氰酸酯(FITC)為熒光標(biāo)記物,利用堿性條
2、件下殼聚糖2-NH2中氮原子與FITC異硫氰基上正電性碳原子發(fā)生親核加成反應(yīng),使殼聚糖分子結(jié)合FITC。隨后,以海藻酸鈣微球為載藥基質(zhì),在酸性條件下海藻酸鈣5-COO。與熒光殼聚糖2-NH<,3><'+>進行聚電解質(zhì)絡(luò)合反應(yīng),微球表面形成鍵合FITC的半透性控釋膜,實現(xiàn)微球的熒光標(biāo)記。系統(tǒng)考察影響微球熒光標(biāo)記的相關(guān)因素,得出優(yōu)化工藝條件。采用膨脹率表征微球膜強度,探討殼聚糖相關(guān)特性、反應(yīng)條件對熒光微球在口服介質(zhì)中膜強度的影響。實驗結(jié)果如
3、下: 1.殼聚糖溶液pH值對熒光標(biāo)記反應(yīng)具有決定性作用。當(dāng)溶液pH>pKa(殼聚糖)時,殼聚糖熒光標(biāo)記效率顯著提高。 2. FITC上帶正電性的碳原子與海藻酸鈣凝膠珠上5-COO<'->共同競爭殼聚糖的2-NH<,2>,因此殼聚糖的熒光標(biāo)記程度對微球的熒光標(biāo)記反應(yīng)有一定的負(fù)面影響。同時殼聚糖分子量、脫乙酰度、濃度、成膜時間以及海藻酸鈣凝膠珠粒徑對微球熒光標(biāo)記反應(yīng)影響顯著。采用5萬分子量、脫乙酰度90%、溶液濃度0.01g
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