圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后期婦女外周血共刺激分子表達及其雌激素變化的研究.pdf

1、[背景]圍絕經(jīng)期是指從接近絕經(jīng)出現(xiàn)與絕經(jīng)有關(guān)的內(nèi)分泌、生物學(xué)和臨床特征起至最后一次月經(jīng)后一年內(nèi)的時期。處于圍絕經(jīng)期的婦女由于卵巢功能衰退，神經(jīng)、內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)均會出現(xiàn)紊亂而出現(xiàn)一系列相應(yīng)的臨床癥狀。
　　機體的免疫系統(tǒng)通過正性和負性共刺激信號的動態(tài)平衡，保持機體免疫狀態(tài)的穩(wěn)定。正性共刺激信號(如B7/CD28)決定了T淋巴細胞是否能識別相應(yīng)抗原來達到免疫的完全激活，相反，T淋巴細胞表達的負性共刺激分子(B7/CTLA-4)則可以

2、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。PD-1（Programmed death-1）是一個新近發(fā)現(xiàn)的共刺激分子，PD-1通過與其兩個配體PD-L1和PD-L2作用而抑制T、B細胞的活化及細胞因子的產(chǎn)生，在維持機體免疫耐受上發(fā)揮至關(guān)重要的作用。同時，PD-1分子也與一系列疾病的免疫病理發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)雌激素(E2)可能通過上調(diào)T細胞PD-1的表達發(fā)揮免疫抑制功能;然而阻斷PD-1/PD-L1通路后雌激素治療可以增加T細胞免疫活性，提示雌激素可能是PD

3、-1分子表達的調(diào)節(jié)因素之一。
　　臨床上大多集中研究圍絕經(jīng)期婦女的激素水平，對該期婦女的免疫功能方面的研究相對較少。對圍絕經(jīng)期婦女共刺激分子表達與雌激素水平的相關(guān)性也未見報道。因此，深入研究圍絕經(jīng)期婦女共刺激分子表達及其與雌激素水平的關(guān)系對于了解圍絕經(jīng)期婦女免疫學(xué)功能下調(diào)的機制具有重要作用。也可為圍絕經(jīng)期珍斷和預(yù)后判斷提供有臨床應(yīng)用意義的生物學(xué)標記。
　　[目的]研究圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后期婦女外周血單個核細胞表面和T細胞表面CD

4、28、CTLA-4、PD-1和PD-L1的表達，旨在了解圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)期婦女相關(guān)免疫細胞表面生物學(xué)標志表達的變化情況，結(jié)合血清雌激素變化情況，探討圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后期婦女內(nèi)分泌、免疫系統(tǒng)之間的關(guān)系及臨床意義。
　　[方法]采用Taqman探針實時熒光定量PCR法、流式細胞術(shù)及化學(xué)發(fā)光法檢測70例圍絕經(jīng)期、40例絕經(jīng)后期和30例育齡期組外周血單個核細胞表面共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、PD-L1mRNA的表達，T細胞表面

5、共刺激分子及T淋巴細胞亞群表達，并與其血清雌二醇(E2)、孕激素(Pg)、卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)水平作綜合分析。
　　[結(jié)果](1)、與育齡期組比較，E2、Pg在圍絕經(jīng)期組和絕經(jīng)后期組顯著下降(P＜0.05);FSH/LH比值在絕經(jīng)后期組和圍絕經(jīng)期組顯著高于育齡期組(P＜0.05);(2)、CD28mRNA組間表達絕經(jīng)后期組最高（6.84±0.56），育齡期組最低（6.37±0.54），差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=5.

6、729，P＜0.05);CTLA-4mRNA間表達量絕經(jīng)后期組最高（6.80±1.01），圍絕經(jīng)期組最低（5.32±0.90），差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=28.594，P＜0.01);PD-1 mRNA組間表達量絕經(jīng)后期組最高（5.46±0.68），育齡期組最低（4.43±0.89），差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=12.222，P＜0.01);PD-L1mRNA組間表達量絕經(jīng)后期最高（5.07±0.85），育齡期組最低（3.82±0.68），差異有

7、統(tǒng)計學(xué)意義(F=24.825，P＜0.01)。(3)、CD3+、CD4+相對表達率及絕對值、CD4+/CD8+比值在三組間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。經(jīng)兩兩比較發(fā)現(xiàn):與育齡期組比較，圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后期組的CD3+、CD4+相對表達率及絕對值以及CD4+/CD8+比值均有不同程度地顯著下降。T細胞表面CD28表達量在三組間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異，其中圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后期組均顯著低于育齡期組;CD28+/CTLA-4+比值在絕經(jīng)后期組顯著

8、低于圍絕經(jīng)期組和育齡期組;PD-1的表達在三組間比較有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后期組均顯著低于育齡期組。(4)、相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn):PD-1、PD-L1mRNA的表達與E2呈不同程度負相關(guān)(r值-0.207、-0.353，P值0.031、＜0.001);CD3+、CD4+T細胞表達量與E2呈顯著的正相關(guān)(r=0.256、0.246，P=0.007、0.005);與年齡呈顯著的負相關(guān)(r=-0.387、-0.456，P＜0.001);

9、CD4+PD-1+與E2呈顯著的正相關(guān)(r=0.550，P＜0.001);CD8+PD-1+與E2呈顯著的正相關(guān)(r=0.554，P＜0.001)。
　　[結(jié)論]
　　1、圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后期婦女存在T淋巴細胞亞群的紊亂，CD3+、CD4+和CD8+T細胞相對表達率及絕對值均下降，提示其T細胞免疫功能失調(diào)。
　　2、外周血單個核細胞表面共刺激分子CD28、PD-1、PD-L1mRNA表達顯著升高，CTLA-4顯著降低，且

10、T細胞表面CD28、CTLA-4、和PD-1的表達量均出現(xiàn)了不同程度的降低，提示共刺激分子表達異?？赡芘c免疫功能失調(diào)有關(guān)。
　　3、CD3+T、CD4+T細胞表達量、CD4+PD-1+、CD8+PD-1+與E2呈顯著的正相關(guān)，提示雌激素可能調(diào)控PD-1分子表達，下調(diào)圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)期婦女免疫功能。
　　綜上所述，圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后期女性內(nèi)分泌激素異常、外周血單個核細胞表面共刺激分子mRNA表達異常及T細胞表面共刺激分子和T淋巴細