特發(fā)性膜性腎病患者腎組織中SOD2的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:膜性腎病(membranous nephropathy, MN)是成年人腎病綜合征(nephrotic syndrome，NS)最常見(jiàn)的病理類型之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，成年人中約75％的病例主要為特發(fā)性膜性腎病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)，而25％的病例則繼發(fā)于各種各樣的原因，包括腫瘤、感染、自身免疫疾病、代謝性疾病以及藥物、毒物損害等。1/4-1/3 IMN患者可完全或部分自發(fā)緩解，大量蛋

2、白尿的患者，自發(fā)緩解率可占到20％左右，其余患者會(huì)緩慢進(jìn)展至終末期腎臟病，或在5-16年后死于并發(fā)癥及其他疾病。近年來(lái)，IMN的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，但其具體發(fā)病機(jī)制的研究仍不是很透徹，普遍認(rèn)為是機(jī)體針對(duì)腎臟足細(xì)胞產(chǎn)生特異性IgG4抗體，形成上皮下免疫復(fù)合物而致病。因此明確IMN的發(fā)病機(jī)制有重要意義，將對(duì)疾病的診斷和治療提供新的幫助。
　　錳超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase，SOD2)是

3、廣泛的抗氧化細(xì)胞保護(hù)系統(tǒng)的重要組成部分，是一種抗氧化金屬酶，可將毒性的超氧化物陰離子轉(zhuǎn)化為過(guò)氧化氫和雙原子氧，在機(jī)體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用。當(dāng)機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子產(chǎn)生過(guò)多，氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，使機(jī)體處于氧化應(yīng)激(oxidativestress，OS)狀態(tài)。OS與很多疾病包括腎臟疾病的發(fā)生、發(fā)展密不可分。OS狀態(tài)時(shí)，SOD2表達(dá)增加，這可以降低OS對(duì)組織造成的損傷。OS損傷的標(biāo)志物多種多樣，其中8-

4、羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine，8-OHdG)是DNA損害的敏感標(biāo)志物。在疾病或某些外源性物質(zhì)刺激下活性氧類(Reactive Oxygen Species，ROS)快速釋放并在體內(nèi)過(guò)度蓄積，致OS超出機(jī)體抗氧化能力而造成DNA的氧化損傷。另有研究發(fā)現(xiàn)，IMN患者腎組織中的SOD2可能作為足細(xì)胞的特異性抗原，參與IMN的發(fā)病過(guò)程，促進(jìn)IMN的進(jìn)展。因此研究SOD2在IMN患者腎組織中表達(dá)是很有必要的

5、。本課題旨在研究SOD2在IMN患者腎組織內(nèi)表達(dá)及意義，及其與IgG4表達(dá)部位的聯(lián)系，并檢測(cè)患者血、尿標(biāo)本中8-OHdG的表達(dá)水平，探討OS在IMN發(fā)病中的作用，進(jìn)一步揭示IMN的發(fā)病機(jī)制，為指導(dǎo)臨床治療和觀察預(yù)后提供依據(jù)。
　　方法:病例來(lái)源于2013年6月至2013年12月河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院腎內(nèi)科病房診治的41例IMN住院患者，所有患者均為首次經(jīng)腎穿刺活檢病理檢查確診者。收集首次經(jīng)腎穿刺活檢病理檢查確診的繼發(fā)性膜性腎病(Se

6、condary Membranous Nephropathy, SMN)住院患者13例和微小病變性腎病(minimal change disease，MCD)住院患者6例為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)IMN組、SMN組和MCD組患者腎組織中SOD2及IgG4的表達(dá)部位，結(jié)果通過(guò)圖像分析系統(tǒng)(Image-ProPlus，IPP)進(jìn)行半定量分析。同時(shí)收集IMN組、SMN組和MCD組患者晨起的血液及尿液標(biāo)本，應(yīng)用ELISA定量方法檢測(cè)血液

7、及尿液標(biāo)本中8-OHdG的表達(dá)水平，并探討SOD2與8-OHdG表達(dá)的相關(guān)性。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理， P＜0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，計(jì)數(shù)資料采用率或構(gòu)成比表示。正態(tài)分布資料多組間均數(shù)比較采用方差分析，多重比較采用SNK-q檢驗(yàn)。相關(guān)性檢驗(yàn)采用直線相關(guān)分析。
　　結(jié)果:SOD2在IMN組、SMN組和MCD組患者腎組織腎小管上皮細(xì)胞均有表達(dá)，表達(dá)無(wú)明顯差異;

8、SOD2在SMN組、MCD組患者腎組織腎小球中未見(jiàn)表達(dá);SOD2在IMN組患者腎組織腎小球基底膜、足細(xì)胞和上皮下均有一定表達(dá)。IMN組患者腎組織腎小球內(nèi)SOD2的表達(dá)較SMN組、MCD組均顯著增強(qiáng)(P＜0.01)。IgG4在SMN組、MCD組患者腎組織中未見(jiàn)表達(dá);IgG4在大部分IMN組患者腎組織腎小球基底膜及上皮下有表達(dá)。IMN組與SMN組、MCD組比較，腎小球內(nèi)IgG4表達(dá)明顯增強(qiáng)（P＜0.01）。IMN患者腎小球內(nèi)SOD2的表達(dá)與

9、24小時(shí)尿蛋白定量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.354，P=0.023，P＜0.05);IgG4的表達(dá)與24小時(shí)尿蛋白定量呈正相關(guān)（r=0.361，P=0.021，P＜0.05）。IMN組、SMN組患者血、尿標(biāo)本中8-OHdG表達(dá)水平較MCD組升高(P＜0.05);IMN組與SMN組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:①8-OHdG在IMN患者血液及尿液標(biāo)本中表達(dá)水平升高，證實(shí)IMN發(fā)病過(guò)程中存在DNA的氧化損傷，提示OS參與