ADD3可變剪接在結(jié)腸癌與正常組織間差異表達(dá)的檢測與分析.pdf

1、目的：
　　檢測ADD3及其剪接體在結(jié)直腸癌（CRC)組織、結(jié)直腸息肉組織以及人CRC細(xì)胞株SW480和SW620中的表達(dá)情況，分析ADD3及其剪接體與CRC的相關(guān)關(guān)系，探討ADD3及其剪接體在CRC發(fā)生發(fā)展中的可能作用及其臨床意義。
　　方法：
　　建立T-ADD3、ADD3(-14)和ADD3(+14)Taqman實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-RT-PCR）的方法。用此方法對收集來自本院2012年7月-20

2、13年9月期間的50對CRC組織，20對結(jié)直腸息肉組織進(jìn)行檢測。用奧沙利鉑和5-FU分別干預(yù)人CRC細(xì)胞株SW480（低侵襲性）和SW620（高侵襲性的），用建立的FQ-RT-PCR檢測干預(yù)前后各樣本中ADD3及剪接體的表達(dá)水平。結(jié)果用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：
　　1.成功建立了T-ADD3、ADD3(-14)和ADD3(+14)Taqman FQ-R T-P CR的方法，擴增效率（95％-100%之間

3、），重復(fù)性穩(wěn)定（批間和批內(nèi)CV<1%)。
　　2.在 CRC組織中 T-ADD3與 ADD3(-14)表達(dá)低于正常組織（P<0.001)， ADD3(+14)/(-14)比值高于正常組織（P<0.001)。
　　3.在結(jié)直腸息肉組織中T-ADD3、ADD3(-14)、ADD3(+14)較正常組織表達(dá)減少（P<0.01),ADD3(+14)/(-14)比值與正常組織相比無顯著差異（P>0.05)。
　　4.SW620中

4、ADD3(-14)、ADD3(+14)較 SW480表達(dá)減少（P<0.01, P<0.05),ADD3(+14)/(-14)比值高于SW480（P<0.001)。
　　5.經(jīng)奧沙利鉑和5-FU分別處理兩株細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)SW620升高較SW480顯著：SW480僅ADD3(+14)表達(dá)增加，SW620的ADD3(-14)、ADD3(+14)均有不同程度的升高，SW620的T-ADD3僅在奧沙利鉑組升高顯著。
　　結(jié)論：