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文檔簡介
1、目的:觀察精元康膠囊對骨髓抑制小鼠股骨細(xì)胞外基質(zhì)纖維粘連蛋白(FN)和層粘連蛋白(LN)的影響,探討精元康膠囊改善化療藥物致骨髓抑制的作用機(jī)制。
方法:選用雄性昆明種小鼠56只,鼠齡為6~8周,體重18~22g,將小鼠稱重后隨機(jī)分為7組(正常組、模型組、貞芪扶正膠囊組、利可君片組、精元康膠囊低劑量組、精元康膠囊中劑量組、精元康膠囊高劑量組),每組8只。第1~3天每日上午,正常組腹腔注射等容積生理鹽水,其余各用藥組及模型組小鼠腹
2、腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg。第1~7天每日下午,正常組、模型組用0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)20ml/kg灌胃,貞芪扶正膠囊組(以下簡稱貞芪扶正組)用貞芪扶正膠囊混懸液3mg/20ml/kg灌胃,利可君片組(以下簡稱利可君組)用利可君片懸浮液32mg/20ml/kg灌胃,精元康膠囊低劑量組(以下簡稱精低組)用精元康膠囊混懸液2g/20ml/kg灌胃,精元康膠囊中劑量組(以下簡稱精中組)用精元康膠囊混懸液3g/20ml/kg
3、灌胃,精元康膠囊高劑量組(以下簡稱精高組)用精元康膠囊混懸液4g/20ml/kg灌胃。在小鼠給藥或生理鹽水7d后24h(造模后第8天)進(jìn)行取材。將各組小鼠脫頸處死,并取出左側(cè)股骨,置于福爾馬林中固定3d,經(jīng)脫鈣3w,然后按常規(guī)方法脫水、透明、浸蠟、包埋,切片(3μm)。按免疫組化(SABC)法說明書操作,設(shè)立陰性對照,檢測小鼠股骨LN和FN表達(dá)的變化;取出右側(cè)股骨,在超凈臺下取出骨髓細(xì)胞,制備骨髓細(xì)胞懸液。取部分骨髓細(xì)胞懸液,按照試劑盒
4、說明書,進(jìn)行骨髓FNmRNADE和LNmRNA檢測。
結(jié)果:
1.免疫組化實驗結(jié)果顯示,與模型組相比,各藥物組均能明顯的提高層粘連蛋白和纖維粘連蛋白的表達(dá),其中精元康高膠囊組優(yōu)于利可君片對照組、貞芪扶正對照組。
2.PCR法實驗結(jié)果顯示,與模型組比較,各藥物組均可上調(diào)FNmRNA和LNmRNA基因表達(dá)水平,其中精元康高、中劑量組效果明顯優(yōu)于其他組別。
結(jié)論:精元康膠囊可明顯改善骨髓抑制小鼠造血微環(huán)
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