促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對(duì)嬰幼兒非紫紺型先天性心臟病心內(nèi)直視手術(shù)心肌保護(hù)的作用研究.pdf

1、目的：
　　促紅細(xì)胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一種缺氧誘導(dǎo)分泌的具有促造血作用的激素，具有促進(jìn)紅細(xì)胞生成、增加組織供氧的作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于缺血再灌注損傷的心肌組織，EPO具有良好的保護(hù)作用，能夠抑制心肌細(xì)胞凋亡、保存缺血心肌的ATP水平、抗炎及促進(jìn)心肌血管增生。其部分分子機(jī)制與抑制糖原合成激酶3β，活化PI-3K/Akt，PKC，ERK1/2，線粒體ATP依賴的鉀通道有關(guān)。促紅細(xì)胞生成素已應(yīng)用于臨床

2、多個(gè)領(lǐng)域，但其對(duì)于心肌保護(hù)作用的研究大多數(shù)停留在動(dòng)物試驗(yàn)階段，其對(duì)于人體的用藥劑量仍未明確。本研究的目的是通過EPO對(duì)先心病患兒心內(nèi)直視手術(shù)后心肌組織熱休克蛋白70(HSP70)及細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)表達(dá)的影響及術(shù)后心肌酶譜、肌鈣蛋白、C反應(yīng)蛋白等臨床數(shù)據(jù)探討其對(duì)于缺血再灌注心肌保護(hù)的治療劑量。
　　材料與方法：
　　選取中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院心臟外科2013年4月至2013年11月40名小于2歲的非紫紺

3、型先天性心臟病患兒，進(jìn)行體外循環(huán)(CardiopulmonaryBypass，CPB)心內(nèi)直視手術(shù)。其中男19例，女21例，平均年齡1.2歲，其中室間隔缺損27例，房間隔缺損7例，室間隔缺損合并房間隔缺損5例，室間隔缺損合并房間隔缺損及動(dòng)脈導(dǎo)管未閉3例，室間隔缺損合并右室流出道狹窄1例，術(shù)前心功能Ⅱ級(jí)，無肺動(dòng)脈高壓，無肝腎功能不全，無EPO使用史，圍手術(shù)期無感染。將患者隨機(jī)分為A，B，C三組。其中A組12人，B組12人，C組16人。

4、r>　　A組患者從手術(shù)前12h開始，皮下注射EPO150IU/kg，B組患者從手術(shù)前12h開始，皮下注射EPO300IU/kg，C組患者手術(shù)前12h皮下注射等體積生理鹽水。三組其余處理方式相同。入手術(shù)室后建立靜脈通路，監(jiān)測(cè)心電圖、呼吸、血氧飽和度，橈動(dòng)脈穿刺置管監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)血壓;麻醉誘導(dǎo)用咪達(dá)唑侖0.1～0.05mg/kg，舒芬太尼1～2μg/kg，阿曲庫(kù)銨0.1～0.2mg/kg，行氣管插管，機(jī)械通氣;頸內(nèi)靜脈置管監(jiān)測(cè)中心靜脈壓力(CVP

5、)，麻醉維持;CPB期間保持紅細(xì)胞壓積(Hct)在0.25～0.30之間，淺低溫，鼻溫保持在30℃～32℃，CPB灌注流量(2.8～3.2L·min-1·m-2)，灌注壓維持在90～100mmHg。采用4℃溫血停搏液15ml/kg自主動(dòng)脈根部順行灌注使心臟停跳，隨后劑量減半，每30min灌注1次。所有患者均經(jīng)右心房切口，心內(nèi)操作結(jié)束后開放升主動(dòng)脈，復(fù)溫至37.5℃，循環(huán)穩(wěn)定后停CPB，縫合右房切口，依次拔除各個(gè)插管。此時(shí)應(yīng)用心耳鉗鉗夾右

6、心耳，迅速剪下心耳組織后縫扎右心耳。取下心肌組織于液氮中保存。分別于入院后及手術(shù)后第24、48、72h這4個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、高敏感度C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平。Real-timePCR方法檢測(cè)右心耳心肌組織HSP70mRNA和ERK1/2mRNA的表達(dá)水平，并用相關(guān)分析分析HSP70mRNA和ERK1/2mRNA的表達(dá)量的相關(guān)關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)

7、±s）來表示，采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　1、三組患者術(shù)前一般資料情況及手術(shù)體外循環(huán)時(shí)間和主動(dòng)脈阻斷時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三組患者均無死亡、無嚴(yán)重并發(fā)癥、無血栓栓塞發(fā)生。與對(duì)照組（2.7±0.17）相比，A組（11.2±0.66）、B組（6.3±0.43）HSP70均顯著升高(P＜0.01);A組與B組相比，A組HSP70顯著升高(P＜0.01)。與對(duì)照組（4.5±0.10）組比較，A組（19.0

8、±0.15）及B組（13.5±0.16）ERK1/2mRNA表達(dá)水平顯著升高(P＜0.01);A組與B組比較，A組ERK1/2mRNA升高顯著（P＜0.01）。
　　2、A組和B組在手術(shù)結(jié)束后各時(shí)間點(diǎn)CK、CK-MB、cTnⅠ、hs-CRP明顯低于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3、A組和B組患者血CK、CK-MB、cTnⅠ、hs-CRP水平在手術(shù)后明顯升高(P＜0.05)，A組升高水平在手術(shù)后第24、48、7