基于磁性納米顆粒、納米磷酸鈣和超支化聚合物復(fù)合載體的基因轉(zhuǎn)染研究.pdf

1、基因治療的成功有賴于高效、安全和靶向的載體系統(tǒng)，將目標(biāo)DNA轉(zhuǎn)移至靶細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行表達(dá)。磁性納米顆?？稍谕饧哟艌?chǎng)的作用下，將DNA快速牽引至細(xì)胞表面，這種“磁轉(zhuǎn)染”(magnetofection)技術(shù)已成為非病毒基因載體中一個(gè)新的發(fā)展分支。磷酸鈣是一種傳統(tǒng)的基因轉(zhuǎn)染材料，轉(zhuǎn)染效率較低但是生物相容性好，如何改進(jìn)使其克服可控性差的缺點(diǎn)是載體研究者的目標(biāo)。此外，陽(yáng)離子聚合物載體在基因轉(zhuǎn)染中的應(yīng)用正日益廣泛，但是關(guān)于其構(gòu)效關(guān)系的研究還未深入。為此

2、，我們制備了一系列不同表面電荷修飾的磁性納米顆粒、形態(tài)可控的納米磷酸鈣及其與磁顆粒的復(fù)合材料、不同支化度的聚酰胺大分子，用于基因的可控傳遞和表達(dá)。完成的工作包括以下幾個(gè)方面：
　　 (1)分別制備了聚乙烯亞胺(PEI)、羧甲基葡聚糖、檸檬酸、氨基硅烷、甜菜堿修飾的四氧化三鐵納米顆粒，將這些磁性納米顆粒、PEI和DNA復(fù)合在一起用于基因轉(zhuǎn)染。結(jié)果表明，以上各種表面修飾的磁性納米顆粒，只要磁顆粒表面有足夠的電荷，都能使DNA快速富集

3、到細(xì)胞的表面，起到增強(qiáng)轉(zhuǎn)染的作用。
　　 (2)制備了磷酸鈣納米球、羥基磷灰石納米棒以及磷酸鈣—四氧化三鐵復(fù)合納米材料，能通過(guò)鈣離子的調(diào)節(jié)，高效地載帶DNA并將其轉(zhuǎn)移進(jìn)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染載體。
　　 (3)合成了一系列不同支化度的聚酰胺大分子(PMA)，能與DNA通過(guò)靜電復(fù)合。改變PMA的支化度，會(huì)顯著地影響其與DNA復(fù)合的能力、細(xì)胞毒性以及轉(zhuǎn)染效率。支化度最大的PMA其轉(zhuǎn)染效率與PEI相當(dāng)。