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文檔簡介
1、第一部分:慢性腎臟病患者外周血淋巴細胞分型與腎功能的關(guān)系及其相關(guān)因素
目的:慢性腎臟病(CKD)患者因氧化應激、尿毒癥毒素潴留、代謝紊亂等因素的影響,免疫激活與免疫抑制狀態(tài)并存,這與CKD患者高發(fā)的心腦血管事件及感染事件密切相關(guān)。以往大多數(shù)研究集中于尿毒癥患者的免疫系統(tǒng)功能障礙,很少有研究關(guān)注CKD患者的免疫功能狀態(tài)。本研究旨在比較不同CKD分期患者的淋巴細胞亞群水平,探討免疫細胞計數(shù)的變化與腎功能的關(guān)系及其影響因素。
2、 方法:收集2012年10月至2013年4月于復旦大學附屬中山醫(yī)院腎內(nèi)科住院的458例CKD患者的相關(guān)臨床資料,采用流式細胞術(shù)檢測外周血淋巴細胞分型(CD19+,CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3-CD56+CD16+),同時檢測相關(guān)臨床生化指標,采用單因素方差分析和Kruskal-Wallis檢驗比較CKD各期淋巴細胞亞群水平,采用線性相關(guān)分析淋巴細胞亞群與腎小球濾過率的關(guān)系。變量相關(guān)性分析采用Pearson或Sp
3、earman相關(guān)分析。多因素分析采用Logistic回歸分析。
結(jié)果:
1.458例CKD患者中,男性279例(60.9%),女性179例(39.1%),年齡51.1±16.2歲,eGFR55.27±38.69ml/min/1.73m2,合并高血壓318例(69.4%),糖尿病113例(24.7%),CVD病史69例(15.1%)。
2.淋巴細胞數(shù)、中性粒細胞/淋巴細胞(NLR)、B細胞數(shù)、B細胞百分比、C
4、D3+T細胞數(shù)、CD3+T細胞百分比、CD4+T細胞數(shù)、CD8+T細胞數(shù)、NK細胞、NK細胞百分比在CKD各期有顯著差異(p均<0.05)。線性分析顯示eGFR與B細胞數(shù)(r=101.258,p<0.001)、B細胞百分比(r=1.883,p<0.001)、CD3+T細胞數(shù)(r=28.695,p<0.001)、CD4+T細胞數(shù)(r=41.983,p<0.001)、CD8+T細胞數(shù)(r=45.419,p<0.001)呈顯著正相關(guān),與NK細
5、胞百分比(r=-1.460,p<0.001)呈顯著負相關(guān),進一步多因素線性回歸結(jié)果示B細胞數(shù)與eGFR呈獨立正相關(guān)(β=19.516,p=0.012),CD4+T細胞數(shù)與eGFR呈獨立正相關(guān)(β=8.898,p=0.014),NK細胞百分比與eGFR呈獨立負相關(guān)(β=-12.295,p=0.010)。進一步將NK細胞百分比、B細胞數(shù)、CD4+T細胞數(shù)同時帶入回歸方程,結(jié)果顯示僅B細胞數(shù)和NK細胞百分比與eGFR呈獨立相關(guān)(p均<0.05
6、)。
2.B細胞數(shù)與Hb、TC、TG、HDL-C、LDL-C、CO2、Ca水平呈顯著正相關(guān),與年齡、既往高血壓病史、CCB服用史、CVD史、SBP、Hcy、BUN、sCr、CystatinC、UA、P、β2-M、hsCPR、NT-proBNP、iPTH水平呈顯著負相關(guān)(p均<0.01)。B細胞數(shù)在原發(fā)性腎小球疾病、糖尿病腎病、高血壓性腎病間存在顯著差異(p<0.001),原發(fā)性腎小球疾病者B細胞數(shù)顯著低于糖尿病腎病和高血壓性腎
7、病者。進一步多因素線性回歸分析示TG、HDL-C與B細胞數(shù)呈獨立正相關(guān),年齡、β2-M、25OH-vitD、NT-proBNP與B細胞數(shù)呈獨立負相關(guān)(p均<0.05)。
3.CD3+T細胞數(shù)與吸煙史、Hb、TC、TG、LDL-C、CO2、 Ca水平呈顯著正相關(guān),與年齡、既往高血壓病史、CCB服用史、CVD史、SBP、Hcy、BUN、sCr、Cystatin C、UA、P、β2-M、hsCPR、NT-proBNP、iPTH水平呈
8、顯著負相關(guān)(p均<0.01)。CD3+T細胞數(shù)在原發(fā)性腎小球疾病、糖尿病腎病、高血壓性腎病間存在顯著差異(p<0.01),原發(fā)性腎小球疾病者CD3+T細胞數(shù)顯著低于糖尿病腎病和高血壓性腎病者。進一步多因素線性回歸分析結(jié)果顯示既往吸煙史、尿酸、eGFR、LDL-C、TG、鈣、血紅蛋白與CD3+T細胞數(shù)呈獨立正相關(guān),年齡、男性與CD3+T細胞數(shù)呈獨立負相關(guān)(p均<0.05)。
4.CD4+T細胞數(shù)與吸煙史、Hb、TC、TG、LDL
9、-C、CO2、Ca水平呈顯著正相關(guān),與年齡、既往高血壓病史、CCB服用史、CVD史、SBP、Hcy、BUN、sCr、Cystatin C、UA、P、β2-M、hsCPR、NT-proBNP、iPTH水平呈顯著負相關(guān)(p均<0.05)。多因素線性回歸分析結(jié)果顯示既往吸煙史、LDL-C、TG、尿酸、鈣與CD4+T細胞數(shù)呈獨立正相關(guān),年齡、肌酐與CD4+T細胞數(shù)呈獨立負相關(guān)(p均<0.05)。
5.CD8+T細胞數(shù)與Hb、TC、TG
10、、LDL-C、CO2、Ca水平呈顯著正相關(guān),與年齡、既往高血壓病史、CCB服用史、SBP、Hcy、BUN、sCr、Cystatin C、UA、β2-M、NT-proBNP、iPTH水平呈顯著負相關(guān)(p均<0.01)。CD8+T細胞數(shù)在原發(fā)性腎小球疾病、糖尿病腎病、高血壓性腎病間存在顯著差異(p<0.01),原發(fā)性腎小球疾病者CD8+T細胞數(shù)顯著低于糖尿病腎病和高血壓性腎病者。進一步多因素線性回歸分析結(jié)果顯示血紅蛋白、尿酸、eGFR與CD
11、8+T細胞數(shù)呈獨立正相關(guān),年齡、男性與CD8+T細胞數(shù)呈獨立負相關(guān)(p均<0.05)。
6.NK細胞數(shù)與年齡、ACEI/ARB、β-受體阻滯劑類藥物服用史、Hb、Alb、Ca、TRF、25OH-vitD呈顯著正相關(guān),與DBP、P、NT-proBNP呈顯著負相關(guān)(p均<0.05)。進一步多因素線性回歸結(jié)果示年齡、β-受體阻滯劑類藥物服用史、血紅蛋白、鈣與NK細胞數(shù)呈獨立正相關(guān),既往CVD史、eGFR、Hcy、 iPTH與NK細胞
12、數(shù)呈獨立負相關(guān)。NK細胞百分比與年齡、高血壓史、CVD史、ACEI/ARB、CCB、β-受體阻滯劑類藥物服用史、Alb、Hcy、BUN、sCr、UA、Cystatin C、β2-M、TRF、NT-proBNP、iPTH、25OH-vitD呈顯著正相關(guān),與Hb、TC、TG、LDL-C、CO2呈顯著負相關(guān)(p均<0.01)。進一步多因素線性回歸分析結(jié)果顯示年齡、β-受體阻滯劑類藥物服用史、鈣與NK細胞百分比呈獨立正相關(guān),eGFR、TG、iP
13、TH、二氧化碳與NK細胞百分比呈獨立負相關(guān)(p均<0.05)。
結(jié)論:慢性腎臟病患者外周血淋巴細胞總數(shù)和淋巴細胞分型與CKD分期密切相關(guān),隨著腎功能下降,B細胞和CD3+T細胞降低,NK細胞百分比升高,這可能與CKD患者合并高血壓、脂代謝紊亂、鈣磷代謝紊亂、高尿酸血癥等因素密切相關(guān)。
第二部分:外周血淋巴細胞分型與原發(fā)性腎小球腎病病理類型的關(guān)系
目的:原發(fā)性腎小球腎病(PGD)仍然是中國終末期腎病(ESRD
14、)患者的首要病因,本研究旨在比較不同PGD病理類型的淋巴細胞亞群水平,探討淋巴細胞亞群水平與原發(fā)性腎小球疾病病理類型的關(guān)系。
方法:收集2012年10月至2014年1月于復旦大學附屬中山醫(yī)院腎內(nèi)科住院行腎臟穿刺的原發(fā)性腎小球疾病患者的相關(guān)臨床資料,采用流式細胞術(shù)檢測外周血淋巴細胞分型(CD19+,CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3-CD56+CD16+),同時檢測相關(guān)臨床生化指標。采用單因素方差分析和Krus
15、kal-Wallis檢驗比較各變量在不同腎臟病理類型間的差異,采用無序多分類Logistic回歸分析淋巴細胞亞群水平與腎臟病理類型的關(guān)系。
結(jié)果:
1.251例PGD患者中男性136例(54.2%)、女性115例(45.8%)、年齡44.4±16.0歲,腎小球濾過率78.67±44.69 ml/min/1.73m2,合并高血壓112例(44.6%),糖尿病22例(8.8%)、合并CVD病史10例(4.0%)。腎臟病理
16、類型包括FSGS42例(16.7%),IgAN97例(38.6%),MN52例(20.7%),MCD31例(12.4%),MsPGN15例(6.0%),SGN9例(3.6%),MPGN5例(2.0%)。
2.CD3+T細胞數(shù)在FSGS組、IgAN組、MN組、MCD組間有顯著差異(p=0.040),進一步兩兩比較示MN組CD3+T細胞數(shù)顯著低于MCD組[(1.37±0.57)×109/L vs.(1.72±0.63)×109/L
17、, p=0.025]。
3.CD8+T細胞數(shù)在FSGS組、IgAN組、MN組、MCD組間有顯著差異(p=0.005),進一步兩兩比較示MN組CD8+T細胞數(shù)顯著低于MCD組[(0.45±0.28)×109/L vs.(0.59±0.22)×109/L, p=0.002]。
4.NK細胞在FSGS組、IgAN組、MN組、MCD組間有顯著差異(p=0.003),進一步兩兩比較示MCD組NK細胞顯著低于FSGS組[(0.1
18、4±0.07)×109/L vs.(0.23±0.14)×109/L,p=0.004]、IgAN組[(0.14±0.07)×109/L vs.(0.20±0.10)×109/L,p=0.011]和MN組[(0.14±0.07)×109/L vs.(0.22±0.12)×109/L,p=0.007]。對年齡、性別、糖尿病、高血壓、吸煙史、BMI、eGFR、hsCRP、24小時尿蛋白、白蛋白、血紅蛋白、尿酸、TC、TG、HDL-C、LDL-
19、C、鈣、磷、二氧化碳、iPTH、25OH-vitD、TRF、β2-M、Hcy、SF進行校正后,NK細胞數(shù)在各腎臟病理類型中仍有顯著差異(p=0.044), FSGS的NK細胞數(shù)顯著高于MCD(OR:30.472,95%CI[1.346~690.094],p=0.032),IgAN的NK細胞數(shù)顯著高于MCD(OR:51.760,95%CI[2.712~987.800],p=0.009),MN的NK細胞數(shù)顯著高于MCD(OR:52.391,
20、95%CI[1.434~1980.396], p=0.031)。
5.NK細胞百分比在FSGS組、IgAN組、MN組、MCD組間有顯著差異(p<0.001),進一步兩兩比較示MCD組NK細胞百分比顯著低于FSGS組(6.5±3.7%vs.11.1±7.0%,p=0.001)、IgAN組(6.5±3.7% vs.10.4±5.4%,p<0.001)和MN組(6.5±3.7%vs.11.7±5.6%,p<0.001)。對年齡、性別
21、、糖尿病、高血壓、吸煙史、BMI、eGFR、hsCRP、24小時尿蛋白、白蛋白、血紅蛋白、尿酸、TC、TG、HDL-C、LDL-C、鈣、磷、二氧化碳、iPTH、25OH-vitD、TRF、β2-M、Hcy、SF進行校正后,NK細胞百分比在各腎臟病理類型中仍有顯著差異(p=0.022),IgAN的NK細胞百分比顯著高于MCD(OR:65.076,95%CI[2.831~1496.123],p=0.009),MN的NK細胞百分比顯著高于MC
22、D(OR:84.056,95%CI[1.692~4174.874],p=0.026)。
結(jié)論:外周血淋巴細胞分型與原發(fā)性腎小球疾病病理類型密切相關(guān),CD3+T細胞數(shù),CD8+T細胞數(shù)和NK細胞數(shù)在不同病理類型間存在顯著差異。MCD者NK細胞數(shù)顯著低于FSGS、IgAN和MN者,提示NK細胞可能與原發(fā)性腎小球疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
第三部分:外周血淋巴細胞分型與原發(fā)性腎小球疾病蛋白尿轉(zhuǎn)歸的關(guān)系
目的:蛋白尿作為
23、原發(fā)性腎小球疾病患者最重要的臨床表現(xiàn)之一,同時也是臨床上評估治療效果的重要指標。蛋白尿的緩解通常預示著有效的治療和良好的預后。免疫調(diào)節(jié)在原發(fā)性腎臟病進展和治療反應中起著舉足輕重的作用,但目前尚無反映原發(fā)性腎小球疾病患者免疫系統(tǒng)狀況的有效指標。本研究旨在以淋巴細胞亞群水平為觀察指標,探討其與原發(fā)性腎小球疾病蛋白尿轉(zhuǎn)歸的關(guān)系。
方法:收集2012年10月至2013年6月于復旦大學附屬中山醫(yī)院腎內(nèi)科住院行腎臟穿刺的原發(fā)性腎小球疾病患
24、者的臨床資料臨床及血清學資料,并進行6個月的隨訪,根據(jù)蛋白尿轉(zhuǎn)歸情況分為蛋白尿緩解組(24小時尿蛋白≤0.3g或蛋白尿較治療前基線下降≥50%),蛋白尿未緩解組(24小時蛋白尿較治療前降低<50%或較治療前上升)。兩組正態(tài)數(shù)據(jù)的比較采用兩獨立樣本t檢驗,偏態(tài)數(shù)據(jù)和分類資料分別采用Mann-Whintey U檢驗和X2檢驗。進一步采用無序多Logistic回歸分析淋巴細胞亞群水平與蛋白尿轉(zhuǎn)歸的關(guān)系。
結(jié)果:
1.共81
25、例患者完成隨訪進入本研究,其中男性47例(58.0%),女性34例(42.0%),年齡43.5±16.9歲,eGFR81.08±27.61 ml/min/1.73m2,合并高血壓35例(43.2%),糖尿病7例(8.6%)。腎穿病理包括FSGS11例(13.6%),IgAN25例(30.9%), MN22例(27.2%),MCD16例(19.8%),MPGN2例(2.5%),MsPGN4例(4.9%),SGN1例(1.2%)。
26、 2.治療6個月后蛋白尿緩解者43例,蛋白尿未緩解者38例,兩組患者在年齡(36.1±14.4歲vs.50.5±15.6歲,p<0.001)、吸煙率(9.3% vs.31.6%,p<0.05)、糖尿病患病率(2.3% vs.15.8%,p<0.01)、腎穿前ACEI/ARB類服用率(14.0% vs.36.8%,p<0.01)、CCB類藥物服用率(16.2% vs.34.2%,p<0.05)和eGFR(89.28±26.91ml/min
27、/1.73m2 vs.72.51±25.92ml/min/1.73m2,p<0.01)方面有顯著差異,同時蛋白尿緩解組MN患者比例低(7.0% vs.50.0%,p<0.05),MCD患者比例高(28.6% vs.10.5%,p<0.05)。兩組在ACEI/ARB、糖皮質(zhì)激素服用方面無顯著差異,蛋白尿未緩解組接受免疫抑制劑治療者顯著多于蛋白尿緩解組(55.3% vs.2.3%,p<0.001)。
3.B細胞百分比在蛋白尿緩解組
28、顯著高于蛋白尿未緩解組(16.7±5.7% vs.14.1±5.5%,p=0.029),NK細胞數(shù)[(0.18±0.10)×109/L vs.(0.23±0.12)×109/L,p=0.027]和NK細胞百分比(8.5±4.9%vs.11.1±5.4%,p=0.026)在蛋白尿緩解組顯著低于蛋白尿未緩解組。對年齡、性別、吸煙史、糖尿病、高血壓、腎臟原發(fā)病、基礎(chǔ)腎小球濾過率以及ACEI/ARB類藥物、激素及免疫抑制劑治療史進行校正后,高B
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