Tiam1、DcR3、Kallikrein6在大腸癌中的表達(dá)及與外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究分為三部分: 第一部分:大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移檢測的臨床意義 目的: 大腸癌是最常見的惡性腫瘤之一,血行轉(zhuǎn)移是大腸癌根治性手術(shù)失敗的主要原因之一,也是患者死亡的主要原因。在接受了根治術(shù)的患者中,仍有超過50%的患者最終死于腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,提示手術(shù)時(shí)可能已有大腸癌微轉(zhuǎn)移的存在。本研究以CK20 mRNA作為外周血中大腸癌細(xì)胞存在的特異性標(biāo)志物,探討了大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移檢測的臨床意義,手術(shù)操作和外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系

2、,以及大腸癌組織中微血管密度(microvessel density,MVD)和微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD)與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法: 以CK20mRNA作為外周血中大腸癌細(xì)胞存在的特異性標(biāo)志物,采用RT-PCR技術(shù)檢測大腸癌患者術(shù)前和術(shù)中外周血微轉(zhuǎn)移;采用免疫組織化學(xué)方法檢測大腸癌組織中MVD和LMVD;分析大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移、大腸癌組織中MVD和LMVD與

3、臨床病理參數(shù)的關(guān)系以及大腸癌組織中MVD和LMVD與外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 結(jié)果: 51例大腸癌患者中18例手術(shù)前外周血CK20mRNA呈陽性表達(dá),總陽性表達(dá)率為35.29%(18/51),在Ⅰ~Ⅳ期患者中的陽性表達(dá)率分別為12.50%(1/8)、23.53%(4/17)、35.29%(6/17)和77.78%(7/9),CK20mRNA在外周血中的陽性表達(dá)與TNM分期相關(guān)(P<0.05);手術(shù)中有21例呈陽性表達(dá)(21/51),

4、3例術(shù)前陰性表達(dá)者術(shù)中轉(zhuǎn)為陽性表達(dá),均為直腸癌手術(shù)患者;CK20mRNA在外周血中的陽性表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值、腫瘤分化程度、浸潤深度無關(guān)(P>0.05),但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)(P<0.05);MVD與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值無關(guān)(P>0.05),但與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)(P<0.05);LMVD與患者的性

5、別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值、腫瘤分化程度、浸潤深度無關(guān)(P>0.05),但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)(P<0.01);大腸癌患者外周血CK20mRNA陽性表達(dá)組MVD和LMVD的值分別為58.83±18.28和9.72±1.64,而外周血CK20mRNA陰性表達(dá)組MVD和LMVD的值分別為30.48±9.31和8.21±1.87,顯著低于陽性表達(dá)組(P<0.01)。 結(jié)論: 大腸癌細(xì)胞外周血微轉(zhuǎn)

6、移是大腸癌的早期事件,外周血微轉(zhuǎn)移發(fā)生率隨臨床病理分期的增加而升高,外周血微轉(zhuǎn)移與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān),是反映大腸癌生物學(xué)行為的指標(biāo)之一;手術(shù)操作有可能促進(jìn)直腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移的發(fā)生;MVD與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān);LMVD與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān);大腸癌組織血管化程度和淋巴管生成與外周血微轉(zhuǎn)移密切相關(guān),通過對二者的檢測有助于判斷外周血微轉(zhuǎn)移發(fā)生的情況。 第二

7、部分:Tiam1、DcR3在大腸癌中表達(dá)的臨床意義及與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系 目的: 侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征,也是腫瘤患者死亡的主要原因,因此對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移及其相關(guān)基因的研究具有重要意義。T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1(Tlymphoma invasion and metastasis factor 1,Tiam1)與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。DcR3(decoy receptor 3)是腫瘤壞死因子受體超家族成員,在多

8、種人類惡性腫瘤中出現(xiàn)過度表達(dá),且DcR3的表達(dá)狀態(tài)與惡性腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理分期密切相關(guān)。關(guān)于Tiam1和DcR3與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的研究報(bào)道不多,我們通過檢測Tiam1和DcR3在大腸癌組織和正常大腸粘膜組織中的表達(dá),探討了Tiam1和DcR3表達(dá)與大腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系以及二者與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法: 以CK20mRNA作為外周血中大腸癌細(xì)胞存在的特異性標(biāo)志物,采用RT-PCR方法檢測大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移

9、;采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測大腸癌組織和正常組織中Tiaml和DcR3的表達(dá);分析大腸癌組織中Tiam1和DcR3表達(dá)與臨床病理參數(shù)以及患者外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 結(jié)果: 51例大腸癌組織及正常粘膜組織中均見Tiam1mRNA表達(dá),表達(dá)水平分別為(20.61±4.99)×10-4和(3.49±2.74)×10-4,大腸癌組織中Tiam1mRNA表達(dá)明顯高于正常組織(P<0.01);Tiam1mRNA在伴有外周血微轉(zhuǎn)移的大

10、腸癌組織中的表達(dá)水平為(72.11±2.38)×10-4,在不伴外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中的表達(dá)水平為(15.78±5.01)×10-4,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);大腸癌組織中Tiam1mRNA表達(dá)水平與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值無關(guān)(P>0.05),但與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)(P<0.05);51例大腸癌組織及正常粘膜組織中均見DcR3mRNA的表達(dá),表達(dá)

11、水平分別為(42.40±2.83)×10-4和(12.59±2.55)×10-4,大腸癌組織中DcR3mRNA表達(dá)明顯高于正常組織(P<0.01);DcR3mRNA在伴有外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中表達(dá)水平為(61.53±2.60)×10-4,在不伴外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中表達(dá)水平為(34.60±2.84)×10-4,但二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);DcR3mRNA的表達(dá)水平與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CE

12、A值無關(guān)(P>0.05),但與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論: 大腸癌組織的Tiam1mRNA和DcR3mRNA高表達(dá)與大腸癌的發(fā)生相關(guān);大腸癌組織的Tiam1mRNA和DcR3mRNA表達(dá)水平與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān);Tiam1mRNA高表達(dá)是大腸癌患者發(fā)生外周血微轉(zhuǎn)移的高危因素;但DcR3mRNA高表達(dá)不能作為大腸癌患者發(fā)生外周血微轉(zhuǎn)

13、移的高危因素。 第三部分:Kallikrein6在大腸癌中表達(dá)的臨床意義及與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系 目的: 激肽釋放酶(Kallikreins,KLK)是一組分泌型絲氨酸蛋白酶,存在于多種組織和生物體液中。人KLK基因家族參與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展,多種KLK與前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌和睪丸癌等內(nèi)分泌相關(guān)腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),是此類腫瘤的潛在標(biāo)志物。KLK6異常表達(dá)與多種腫瘤相關(guān)。國內(nèi)目前未見有關(guān)KLK6和大腸癌關(guān)系的報(bào)

14、道。我們通過檢測KLK6mRNA在大腸癌組織和正常大腸粘膜組織中的表達(dá),探討了KLK6表達(dá)與大腸癌臨床病理資料的關(guān)系及其與外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法: 以CK20mRNA作為外周血中大腸癌細(xì)胞存在的特異性標(biāo)志物,采用RT-PCR方法檢測大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移;采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測大腸癌組織和正常組織中KLK6的表達(dá);分析大腸癌組織中KLK6表達(dá)與臨床病理參數(shù)以及患者外周血微轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 結(jié)果: 51例大腸

15、癌組織及正常粘膜組織中均見KLK6mRNA的表達(dá)。大腸癌組織中和正常粘膜組織中KLK6mRNA表達(dá)水平分別為(33.11±2.34)×10-4和(12.88±2.51)×10-4,有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);伴有外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中和不伴外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中KLK6mRNA的表達(dá)水平分別為(40.64±2.05)×10-4和(30.06±2.45)×10-4,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);大腸癌組織的KLK6mRN

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