兩種牙周組織工程支架體內(nèi)異位成骨能力的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的
　　本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)殼聚糖-絲素蛋白（chitosan-silkfibroinCS-SF）支架與殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣（chitosan-silkfibroin-tricalciumCS-SF-TCP）支架的基本性能、力學(xué)性能及異位成骨能力進(jìn)行研究，尋求更適合牙周組織工程的支架。
　　方法
　　采用二次凍干技術(shù)制備兩種支架，液體替代法、冰凍切 片、INSTRON5544拉伸實(shí)驗(yàn)機(jī)對(duì)其一般性能及力學(xué)性能進(jìn)

2、行檢測、全髓貼壁法培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）。將裸鼠24只、雄性、體重20～25g，采用完全隨機(jī)法分為4組，每組6只，CS-SF組、CS-SF+BMSCs組、CS-SF-TCP組、CS-SF-TCP+BMSCs組，所有的植入物均植入裸鼠背部皮下。每只裸鼠背部植入3塊。每組分別于術(shù)后4、8周各處死動(dòng)物3只。通過大體觀察、組織學(xué)與Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察兩種支架的成骨能力。
　　結(jié)果
　　1、支架的一般性能及力學(xué)性能的觀

3、察
　　CS-SF與CS-SF-TCP支架大體外觀呈白色疏松多孔海綿樣物質(zhì)，有一定的彈性與脆性。兩種支架的孔隙率約為70％-80%，孔徑值為100-200μm。置于無水乙醇中有溶脹現(xiàn)象但未發(fā)生溶解。冰凍切片觀察支架的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，可見支架孔徑較均勻且彼此相連。力學(xué)性能的結(jié)果顯示：CS-SF支架的壓縮強(qiáng)度為0.44±0.15MPa，CS-SF-TCP支架的壓縮強(qiáng)度為1.44±0.96MPa。
　　2、大體及組織學(xué)結(jié)果
　　所

4、有的植入物均被一層致密的纖維薄膜包繞，并發(fā)生肉眼可見的吸收現(xiàn)象，觸之稍硬。組織學(xué)染色顯示：4周時(shí)，CS-SF組與CS-SF-TCP組僅見支架的邊緣有纖維膜包繞，支架發(fā)生吸收斷裂，支架的中心并未見細(xì)胞的長入及膠原樣物質(zhì)生成。CS-SF+BMSCs組與CS-SF-TCP+BMSCs組支架的邊緣有纖維膜包繞，支架的中心可見細(xì)胞及膠原樣物質(zhì)生成。8周時(shí)，CS-SF組與CS-SF-TCP組支架的吸收更明顯，仍未見細(xì)胞長入。CS-SF+BMSCs組

5、與CS-SF-TCP+BMSCs組可見細(xì)胞樣物質(zhì)增多,膠原樣物質(zhì)增多增粗。所有組均未見有明顯的骨及類骨質(zhì)樣物質(zhì)生成。
　　3、Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色
　　所有組4、8周時(shí)均可見Ⅰ型膠原陽性表達(dá)，CS-SF組與CS-SF-TCP組陽性表達(dá)主要在支架的邊緣，CS-SF+BMSCs組與CS-SF-TCP+BMSCs組陽性表達(dá)主要在支架的孔隙表面及中央。4、8周時(shí)CS-SF-TCP+BMSCs的平均光密度值均高于CS-SF+BMS