Mibefradil對db-db鼠的降糖作用及其機制初步研究.pdf

1、研究背景:
　　糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一組因長期慢性高血糖導致機體外周組織胰島素敏感性降低,伴或不伴胰島β細胞合成胰島素能力缺陷的內分泌性疾病?，F(xiàn)有許多研究證實糖尿病患者存在細胞內鈣離子調節(jié)紊亂,新近研究表明,胰島β細胞屬電興奮性細胞,β細胞膜ATP依賴的鈣通道及鉀通道是影響胰島素分泌的重要離子通道,在人類和嚙齒類動物中鈣離子通道影響葡萄糖誘導胰島素分泌水平。鈣離子通道阻滯劑是一種通過阻斷細胞膜鈣離子

2、通道,抑制胞外的鈣離子內流,使胞內鈣離子水平降低,繼而調節(jié)靶器官功能的藥物。目前,已有少數(shù)關于L型鈣離子通道阻滯劑對糖尿病影響的報道,但尚未有將T型鈣離子通道阻滯劑應用于糖尿病模型,對其降糖作用的研究報道。本研究擬利用T型鈣離子通道阻滯劑Mibefardil、NNC55-0396以及L型鈣離子通道阻滯劑nicardipine分別干預db/db鼠,觀察對比其降糖效果,并深入了解Mibefardil對糖代謝相關指標及T型鈣離子通道特異性亞基

3、Cav3.1及Cav3.2的表達,并對其作用機制進行初步探討。
　　方法:
　　取8W鼠齡雄性野生型小鼠及db/db鼠各24只,分別按隨機法分為4組(共8組):野生安慰劑組、野生Mibefradil干預組、野生NNC干預組、野生nicardipine干預組、db/db安慰劑組、db/db Mibefradil干預組、db/dbNNC干預組及db/db nicardipine干預組(n=6)。Mibefradil與NNC組予3

4、0mg/(kgd)劑量,nicardipine組予25mg/(kgd)劑量,安慰劑組予等體積生理鹽水,均腹腔注射,分早晚兩次給藥,干預1周;比較實驗動物藥物干預前后血糖、體質量、平均血壓、心率及ITT的變化。重點觀察Mibefradil干預后胰島素、糖化血紅蛋白及總膽固醇的變化水平,并用免疫組織化學法及Western-Blot檢測T型鈣通道特異性亞基Cav3.1及Cav3.2表達水平。
　　結果:
　　(1)與db/db安慰

5、劑組相比,藥物干預后,db/dbMibefradil組及db/db NNC干預組空腹血糖水平顯著下降(P<0.01),其中,Mibefradil早于NNC產生降糖作用,且效果更明顯;db/db nicardipine組無明顯差異(P>0.05);而野生安慰劑組和野生藥物干預各組之間均無明顯差異(均P>0.05);
　　(2)與db/db安慰劑組相比,藥物干預后,db/db Mibefradil組及db/dbNNC干預組均體質量明顯

6、下降(P<0.05),Mibefradil早于NNC產生作用;db/db nicardipine組無明顯差異(P>0.05);而野生安慰劑組和野生藥物干預各組之間均無明顯差異(均P>0.05);
　　(3)與db/db安慰劑組比較,藥物干預后,db/db Mibefradil組24h攝食量、基礎胰島素、糖化血紅蛋白、膽固醇水平均明顯下降(均P<0.05);而野生安慰劑組和野生Mibefradil組均無明顯差異(均P>0.05);<