版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的 初步建立MG胸腺組織蛋白質組學研究方法,獲得雙向電泳凝膠圖譜,篩選出胸腺組織重癥肌無力相關蛋白,并對其作出鑒定。從而尋找MG發(fā)病新線索,幫助臨床診斷和治療。 方法 (1)提取3例MG患者增生型胸腺組織蛋白,以7cmpH3-10IPG膠條做第一向IEF,12%SDS-PAGE垂直電泳為第二向,分析二維電泳系統(tǒng)的重復性;以17cmpH3-10IPG膠條做第一向IEF,評價分別由樣品裂解液Ⅰ和Ⅱ組成的兩種不同胸腺
2、組織蛋白提取方法。通過對這些實驗條件的優(yōu)化,獲得MG增生型胸腺組織蛋白雙向電泳凝膠圖譜。 (2)分別利用異體MG患者血清、正常人血清和自身免疫病患者血清為第一抗體,與電泳轉移到硝酸纖維素膜上的蛋白點孵育,做WesternBlotting試驗,在2-DE參考凝膠上挖取MG組特異顯色點所對應的蛋白質點,經胰蛋白酶膠內酶切,對所得多肽混合物進行MALDI-TOF-MS分析,得到PMF數(shù)據(jù),登陸http://prospector.ucs
3、f.edu/ucsfhtml4.0/msfit.htm網(wǎng)站,用MSFit程序在NCBInr.10.13.2004數(shù)據(jù)庫檢索,鑒定蛋白質。 結果 (1)采用樣品裂解液Ⅰ提取胸腺組織蛋白質,使用PDQuest7.1.1軟件對不同時間獲得的銀染凝膠圖譜中相同的蛋白點進行匹配,能夠匹配的蛋白點為497個,匹配率為82.1%; (2)采用樣品裂解液Ⅰ一步法提取胸腺組織蛋白質得到考凝膠圖像有蛋白質點326個,而分別采用樣品裂
4、解液Ⅱ和Ⅰ的兩步法則可檢測到562個蛋白點; (3)三份樣品共12幅凝膠圖像的對比,共獲得明顯存在于各個凝膠的三個標志蛋白點,分子量和等電點分別為:A點82.7KD7.0、B點50.7KD5.76和C點33.3KD5.02; (4)WesternBlotting試驗共獲得5個MG特異顯色點,編號為2、4、6、7、9; (5)經質譜分析得到5個蛋白質PMF圖譜,數(shù)據(jù)庫檢索這些蛋白分別為:2號蛋白點isopeptid
5、aseT、4號蛋白點importinbetasubunit和6號蛋白點SOULprotein。7號和9號蛋白點未能得到確認,需要更換檢索條件或進行蛋白質測序才能進一步認定。 結論 (1)建立了MG胸腺組織蛋白質提取的方法。采用由樣品裂解液Ⅰ和Ⅱ組成的兩步法提取胸腺組織蛋白質可以獲得更為完整的MG胸腺組織蛋白2-DE圖像。 (2)通過對試驗條件的優(yōu)化處理,獲得MG胸腺組織蛋白雙向電泳凝膠圖像,初步建立了MG胸腺組織
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 重癥肌無力患者胸腺組織蛋白4.1r的鑒定及表達研究
- 胸腺瘤與重癥肌無力
- 重癥肌無力胸腺組織比較蛋白質組學研究.pdf
- 重癥肌無力胸腺差異蛋白質組學研究.pdf
- 重癥肌無力患者胸腺組織基因表達譜的初步研究.pdf
- 胸腺瘤的病理類型、Masaoka臨床分期與重癥肌無力、術后重癥肌無力危象相關性分析.pdf
- 重癥肌無力合并胸腺瘤的外科治療.pdf
- 胸腺五肽對重癥肌無力的藥效研究.pdf
- 重癥肌無力簡介
- 重癥肌無力教學
- 重癥肌無力myastheniagravis
- 重癥肌無力個案
- 胸腺切除治療重癥肌無力47例隨訪研究.pdf
- AIRE基因在重癥肌無力相關胸腺瘤中的表達研究.pdf
- 重癥肌無力危象
- 重癥肌無力的麻醉
- 重癥肌無力護理
- 病例討論——重癥肌無力
- 重癥肌無力ppt課件
- 重癥肌無力指南2015
評論
0/150
提交評論