FHIT蛋白在直腸癌組織芯片中表達(dá)及與細(xì)胞凋亡相關(guān)性研究.pdf

1、背景：FHIT基因是新的抑癌基因，參與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展；其抑癌機(jī)制可能與細(xì)胞凋亡有關(guān)。 研究目的：1.分析FHIT蛋白在直腸癌各組織中的表達(dá)以及直腸癌中FHIT蛋白表達(dá)與其病理、臨床特征的關(guān)系，探討FHIT基因在直腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及意義；2.研究直腸癌中的FHIT蛋白表達(dá)與凋亡相關(guān)基因蛋白Bax、Bcl-2、Survivin表達(dá)及細(xì)胞凋亡指數(shù)間的關(guān)系，探索FHIT基因和直腸癌細(xì)胞凋亡的相關(guān)性。 方法：選取病理證

2、實存檔組織臘塊(包括正常直腸組織、腺瘤組織各16例，直腸癌組織80例)，按正常、腺瘤、高分化、中分化、中分化、低分化、轉(zhuǎn)移癌順序制作7x8點陣組織芯片兩塊。分別采用FHIT、Bax、Bcl-2、Survivin抗體和免疫組化SP法檢測正常、腺瘤及直腸癌組織中的蛋白表達(dá)，分析各組間FHIT蛋白失活率并分別比較直腸癌FHIT表達(dá)陽性和陰性組中Bax、Bcl-2、Survivin蛋白表達(dá)情況；Tunel法行原位細(xì)胞凋亡檢測，計算凋亡指數(shù)，比較

3、其與FHIT蛋白表達(dá)間的關(guān)系。 結(jié)果；FHIT抗體在細(xì)胞漿中表達(dá)，基本上集中表達(dá)在腫瘤細(xì)胞或者正常直腸上皮細(xì)胞，間質(zhì)少見表達(dá)，在正常組織、腺瘤及癌中表達(dá)率分別為：93.75％(15/16)、75.00％(12/16)、46.25％(37/80)；直腸癌組織FHIT基因表達(dá)明顯減少或缺乏。良性直腸組織FHIT基因異常表達(dá)率為15.63％(5/32)，直腸癌組織異常表達(dá)率為53.75％(43/80)，二者比較，差異有極顯著性(x2=

4、13.57，P=0.000)(表1).其表達(dá)下降與年齡、性別、組織學(xué)類型無關(guān)，和分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Duke，s分級及5年生存率關(guān)系密切(P＜0.05)。 BCL-2抗體在直腸腫瘤及正常組織中定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞漿，表達(dá)細(xì)胞除直腸腫瘤細(xì)胞以外，同時有間質(zhì)淋巴細(xì)胞的表達(dá)，正常組織、腺瘤及癌中表達(dá)率分別為：31.25％(5/16)、43.75％(7/16)、51.25％(41/80)；BAX抗體為細(xì)胞漿或間質(zhì)表達(dá)，多數(shù)表達(dá)位于直腸腫

5、瘤組織及正常組織的細(xì)胞漿，少數(shù)見于間質(zhì)細(xì)胞，背景比較干凈，在正常直腸組織、腺瘤和直腸癌中的表達(dá)分別為：56.25％(9/16)、50.00％(8/16)、72.50％(58/80)；Survivin抗體表達(dá)主要在直腸腫瘤細(xì)胞漿表達(dá)，為散在陽性表達(dá)模式，在正常直腸組織、腺瘤和直腸癌中的表達(dá)分別為：6.25％(1/16)、12.25％(2/16)、77.50％(62/80)。FHIT蛋白和bcl-2(x2=12.76，P=0.000)、ba

6、x(x2=6.75，P=0.009)和survivin(x2=3.89，P=0.048)表達(dá)關(guān)系密切，其表達(dá)下降與bcl-2上調(diào)、bax下調(diào)及survivin表達(dá)上升趨勢相符。 凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，直腸癌FHIT基因表達(dá)程度各級間兩兩比較除(-)及(+/-)外(P=0.09)，余者均P＜0.01，差異有顯著性(F=67.94，P=0.000)。 結(jié)論：1.FHIT蛋白在直腸癌中異常表達(dá)是大概率事件，F(xiàn)HI