聚蘋果酸—羥基喜樹堿軛合物的合成和性質(zhì)研究.pdf

1、腫瘤化學治療的藥物大多存在著嚴重的副作用，并且，由于缺乏對腫瘤的選擇性以及腫瘤的多藥耐藥性，也會導(dǎo)致治療效果的下降。聚合物藥物運載系統(tǒng)（Polymeric Drug Delivery Systems，PDDS）有望解決這些問題。將抗腫瘤藥物或修飾后的抗腫瘤藥物，通過化學鍵接合到聚合物主鏈上，或進一步采用包封的方式轉(zhuǎn)運，可有效改善藥物的水溶性，延長藥物在體內(nèi)的半衰期，得到理想的抗腫瘤效果。其中，聚合物-藥物軛合物（polymer-drug

2、 conjugate）是被廣泛研究的一種PDDS。
　　10-羥基喜樹堿（10-hydrocamptothtecin，HCPT）可選擇性地抑制拓撲異構(gòu)酶I（topoisomerase I，TopoI），通過阻斷酶與DNA的反應(yīng)而導(dǎo)致DNA斷裂和細胞死亡。HCPT抗瘤譜廣，且不會與其他常用抗腫瘤藥物產(chǎn)生交叉耐藥性。對消化道腫瘤（如胃癌、結(jié)腸直腸癌等）、卵巢癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、胰腺癌等都具有顯著的抗腫瘤活性。臨床抗腫瘤的一線用藥。

3、但是，羥基喜樹堿極難溶于水，這也限制了其作為抗腫瘤藥物的應(yīng)用。
　　聚蘋果酸（Poly malic acid，PMLA）是以蘋果酸為唯一單體相互通過酯鍵連接而成的一種脂肪族聚酯。PMLA具有良好的水溶性和生物相容性并且沒有免疫原性，其在生理條件下可以自發(fā)降解為對人體無害的蘋果酸，這些性質(zhì)使其成為一種潛在的新型藥物載體材料。β-聚蘋果酸結(jié)構(gòu)規(guī)整，具有多個活性中心（懸掛羧基），可共價連接多個具有生物學功能的基團，形成納米共聚物。

4、>　　本研究采用β-聚蘋果酸為聚合物主鏈，通過酰胺鍵接合修飾后的羥基喜樹堿，得到聚蘋果酸-羥基喜樹堿軛合物，該軛合物能夠改善羥基喜樹堿的溶解性能。腫瘤組織的pH值低于正常組織0.5～0.7。本研究中采用的酰胺鍵能夠感應(yīng)腫瘤組織的酸性環(huán)境，在聚蘋果酸-羥基喜樹堿到達腫瘤組織的時候，酰胺鍵斷裂，釋放出羥基喜樹堿，達到藥物轉(zhuǎn)運的作用。
　　1.聚蘋果酸的化學全合成
　　參考文獻方法，以L-天冬氨酸（L-aspartic acid）

5、為原料，對天冬氨酸上的氨基用溴取代之后脫水環(huán)合成酸酐，進而得到四元環(huán)內(nèi)酯。通過內(nèi)酯開環(huán)法制備β-聚蘋果酸，該方法得到的聚合物分子量約3kDa。對得到的聚蘋果酸用紅外光譜和核磁共振氫譜進行表征。
　　2.羥基喜樹堿的修飾
　　為使羥基喜樹堿與聚蘋果酸主鏈通過酰胺鍵接合，必須對羥基喜樹堿進行修飾，在羥基喜樹堿上引入氨基。用N-叔丁氧羰基甘氨酸（Boc-glycine）和羥基喜樹堿10位的酚羥基進行反應(yīng)，然后脫去起保護作用的boc

6、基團，在羥基喜樹堿上引入氨基。用紅外光譜和核磁氫譜對所得產(chǎn)物進行表征。
　　3．聚蘋果酸-羥基喜樹堿軛合物的制備和表征
　　按照一定比例稱取聚蘋果酸和修飾后的羥基喜樹堿，以DMF為溶劑，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽（EDC·HCl）為脫水劑，反應(yīng)結(jié)束后，透析除去未反應(yīng)的小分子，冷凍干燥，得到聚蘋果酸-羥基喜樹堿（PMLA-CPT）軛合物。用紅外光譜和核磁共振氫譜對所得軛合物進行表征，用紫外分光光度法測定產(chǎn)

7、品的載藥率。
　　4.聚蘋果酸-羥基喜樹堿軛合物的體外模擬釋藥研究
　　采用動態(tài)透析法模擬聚蘋果酸-羥基喜樹堿軛合物的體外釋藥，高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）法研究該體系在不同pH緩沖液中的釋藥性質(zhì)。結(jié)果表明，在pH5.6、pH6.8及pH7.4的PBS中，羥基喜樹堿16h累積釋放率分別為76.8％，47.2％和18.1％，證實PMLA-HCPT中羥基喜