鈉鈣交換抑制劑KB-R7943與缺血后處理對(duì)離體大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、背景和目的
　　 在心肌細(xì)胞缺血時(shí),細(xì)胞內(nèi)H+增多,發(fā)生酸中毒,使心臟收縮功能減退,代謝發(fā)生障礙,此時(shí)Na+/H+交換活性增加可使細(xì)胞內(nèi)H+外流、Na+內(nèi)流,減輕酸中毒,但同時(shí)由于細(xì)胞內(nèi)Na+增多,促進(jìn)Na+-Ca2+交換,使細(xì)胞內(nèi)Ca2+增多,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載,KB-R7943做為一種選擇性逆向鈉鈣通道抑制劑,減輕細(xì)胞內(nèi)鈣超載;缺血后處理即再灌注前給予反復(fù)的復(fù)灌/停灌可以縮小IR心肌梗死面積,改善心肌功能,保護(hù)血管內(nèi)皮功能,減

2、少凋亡,其可能機(jī)制是缺血后處理延緩細(xì)胞內(nèi)鈣超載。缺血后處理和逆向鈉鈣通道交換抑制劑KB-R7943都具有心肌保護(hù)作用,但是尚存在爭議。本研究的目的就是1)驗(yàn)證缺血后處理和逆向鈉鈣通道交換抑制劑KB-R7943在離體大鼠心肌缺血再灌注模型下的心肌保護(hù)作用;2)觀察KB-R7943在心肌壞死和凋亡方面是否具有和缺血后處理相同的效應(yīng);3)進(jìn)一步探討二者合用的效果。
　　 實(shí)驗(yàn)方法
　　 離體大鼠隨機(jī)分為4組:1)對(duì)照組(n=1

3、2)僅經(jīng)過24min全心缺血處理和120min再灌注處理。2)KB-R7943組(n=12),和對(duì)照組一樣,但是在再灌注開始時(shí)給與含1μMKB-R7943的灌注液,共5min。3)缺血后處理(IPost)組(n=12),和對(duì)照組一樣,但是在再灌注開始時(shí)給與3個(gè)循環(huán)的短暫的10S灌注(R)/10S缺血(I),4)聯(lián)用組(n=12),和對(duì)照組一樣,但是在再灌注開始時(shí)同時(shí)進(jìn)行缺血后處理和給與1μMKB-R7943的灌注液5分鐘。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用心功

4、能記錄儀測定心功能、TTC染色法測定心肌梗死面積、脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)和caspase-3活性測定判斷凋亡水平,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果
　　 1、KB-R7943組較對(duì)照組能明顯減少心肌梗死面積(28.6±3.4%vs.46±8.7%,P＜0.05);缺血后處理組較對(duì)照組能明顯減少心肌梗死面積(29.5±4.1%vs.46±8.7%,P＜0.05);KB-R7943組和缺血

5、后處理組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上對(duì)心肌的保護(hù)沒有差異(P＞0.05);二者合用較對(duì)照組未能明顯減少心肌梗死面積(42.8±5.0%vs.46±8.7%,P＞0.05)。
　　 2、KB-R7943組較對(duì)照組能明顯減少細(xì)胞凋亡(TUNEL法,8.8±0.65%vs.14.6±1.1%,p＜0.01),缺血后處理組較對(duì)照組能明顯減少凋亡百分比(9.6±0.52%vs.14.6±1.1%,p＜0.01),KB-R7943組和缺血后處理組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上對(duì)

6、心肌的保護(hù)沒有差異(P＞0.05),二者合用較對(duì)照組未能明顯減少心肌細(xì)胞凋亡(13.8±1.0%vs.14.6±1.1%,P＞0.05)。
　　 3、KB-R7943組和缺血后處理組的caspase-3活性分別是對(duì)照組活性的58%,57%,二者相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,二者合用和對(duì)照組比無明顯差異。
　　 4、心功能方面:HR在各組并無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而KB-R7943組和缺血后處理組能提高再灌注時(shí)的+/-dp/dt,LVD

7、P。
　　 結(jié)論
　　 1、在我們試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?KB-R7943具有和缺血后處理一樣的心肌保護(hù)作用,其機(jī)制可能是通過降低caspase-3活性,進(jìn)而降低凋亡來實(shí)現(xiàn)的,作為一種藥物后處理對(duì)心肌保護(hù)有著更為合理的臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　 2、KB-R7943和缺血后處理合用沒有心肌保護(hù)作用,其可能機(jī)制是KB-R7943取消了缺血后處理的鈣超載預(yù)適應(yīng)作用,從而取消了KB-R7943和缺血后處理減少心肌細(xì)胞凋亡的作用,具體機(jī)制