皮膚重疊擴張的極限以及相關(guān)組織學(xué)變化的研究.pdf

1、目的：觀察實驗動物皮膚經(jīng)重疊擴張(overlappingtissueexpansion)達到極限擴張(extrematissueexpansionETE)狀態(tài)時的皮膚擴張率、即時回縮率、皮膚厚度及組織學(xué)變化，將結(jié)果與常規(guī)擴張(routinetissueexpansionRTE)對比，以確定皮膚軟組織的最大擴張率，推斷限制皮膚擴張面積的因素。為臨床進一步探索能夠充分利用供區(qū)皮膚軟組織的最佳擴張方法提供理論依據(jù)。 方法： 1

2、試驗動物 白色小家豬六頭雌雄不限，稱重編號。 2分組 于每頭小家豬背部脊柱兩側(cè)設(shè)計4個對稱分布的擴張區(qū)，共計24個擴張區(qū)，分為2組，極限擴張組(ETE組)和常規(guī)擴張組(RTE組)，于擴張區(qū)相似部位未擴張?zhí)幦≌Ｆつw作為空白對照組(blankcontrolgroupBC組)。氯胺酮(20mg/kg)肌肉注射全身麻醉下在實驗動物背部皮下淺筋膜深層埋植一枚或多枚皮膚軟組織擴張器，在擴張皮瓣區(qū)文刺黑色方格，邊長2cm，至

3、埋置擴張器的腔隙邊緣外13～15cm。 3擴張器植入及注水方法 ETE組植入兩枚擴張器分別為70ml和50ml，重疊放置；RTE組常規(guī)植入70ml擴張器一枚。實驗動物待切口愈合拆線后，擴張方法采用常規(guī)擴張：每3～5d氯胺酮(20mg/kg)肌肉注射麻醉下注水一次，每次注水量根據(jù)擴張皮瓣松弛度及擴張器的容積而定，以皮瓣指壓反應(yīng)4～5s為限。ETE組注水直至項部擴張區(qū)皮膚呈現(xiàn)菲薄透明、血運障礙、彈力明顯下降為止；RTE組擴張

4、區(qū)注水至擴張器額定容量72h后取材。 4取材 氯胺酮20mg/kg、安定1.5mg/kg、阿托品0.01mg/kg肌肉注射麻醉下將完成擴張的皮瓣項部最充分擴張部分切取送檢。同時取相似部位未經(jīng)擴張的正常皮膚作為對照，取下的標本分為兩部分，分別以4％中性戊二醛和中性甲醛固定，送透射電鏡檢查和制作石蠟切片。其中石蠟切片分別作常規(guī)HE染色、維多利亞藍染色。 5觀測指標 (1)擴張率：待擴張完成后，以無彈性的棉布按

5、照方格大小形狀裁剪成布樣，并將棉布圖樣描繪在硫酸紙上，通過硫酸紙稱重間接反映其擴張面積與周邊未經(jīng)擴張區(qū)域的自然生長面積，計算皮瓣不同部位擴張率的變化。(2)即時回縮率：于各組擴張皮瓣項部取1cm×1cm皮瓣計算即時回縮率，同時取相鄰部位未經(jīng)擴張的正常皮膚作為對照。(3)光鏡下觀察常規(guī)HE染色切片的組織學(xué)變化，并應(yīng)用顯微標尺測量標本的真皮和表皮厚度；光鏡下觀察維多利亞藍染色切片，比較各組標本真皮中膠原纖維、彈力纖維的組成變化。(4)透射電

6、鏡下觀察表皮基底層和棘細胞層中的橋粒及半橋粒的變化、真皮中基質(zhì)及成纖維細胞的亞細胞結(jié)構(gòu)變化，對比各組之間的異同。 6統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPASS11.5統(tǒng)計學(xué)處理軟件，對試驗結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果： 1擴張比率 ETE組擴張率為(508.91±82.99)％，RTE組擴張率為(110.86±14.6)％，ETE組擴張率大于RET組359.5％(P＜0.05)。 2即時回縮率 ET

7、E組即時回縮率為(17.56±1.65)％，RTE組即時回縮率為(34.24±1.06)％，BC組即時回縮率為(21.13±0.86)％。各組間兩兩比較均有顯著性差異(P＜0.05)。 3光鏡觀察 3.1HE染色及真皮、表皮厚度測定 光鏡下放大100倍可見ETE組真皮層內(nèi)可見廣泛毛細血管出血，此現(xiàn)象在RTE組中未見。BC組真皮層厚度為2.393±0.128mm，表皮層厚度為0.09±0.0019mm。RTE組真皮

8、層厚度為1.929±0.132mm，與BC組相比降低19.39％(P＜0.05)；表皮層厚度為0.188±0.0030mm，較BC組增厚108.89％(P＜0.05)。ETE組真皮層厚度與BC組皮膚相比降低79.57％(P＜0.05)，與RTE組皮膚相比厚度減低75％(P＜0.05)；表皮層厚度為0.180±0.0036mm較BC組皮膚增厚100％(P＜0.05)，但于RTE組相比無顯著差異(P＞0.05)。 3.2維多利亞藍染

9、色 RTE組膠原纖維較正常組細小、間距擴大；ETE組膠原纖維更加細小，間距進一步擴大。RTE組彈力纖維增生；ETE組則含量減低且廣泛斷裂。 4電鏡觀察 ETE組表皮基底細胞和真皮中成纖維細胞的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的病理改變，并可見壞死灶散在分布。而RTE組中超微結(jié)構(gòu)改變輕微，兩組間對比差別顯著。 結(jié)論：采用重疊擴張術(shù)可使皮膚達到擴張極限，當(dāng)皮膚達到擴張極限時，出現(xiàn)一系列特有的病理改變。由