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文檔簡介
1、目的:通過建立上氣道阻塞引起的阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)新西蘭兔模型,研究下頜前移矯治器(MAD)治療OSAHS對兔血漿內(nèi)皮素-1(ET-1)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)水平和腎皮質(zhì)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達的影響,為OSAHS引起多系統(tǒng)損害的臨床治療,提供理論依據(jù)和實驗室數(shù)據(jù)。
方法:30只雄性新西蘭兔隨機分為3組:OSAHS組、MAD組和對照組,每組10只。OSAHS組和MAD組以1%戊巴比妥鈉行
2、全身麻醉,于軟腭中間距軟硬腭交界0.5cm處,粘膜下肌層注射聚丙烯酰胺水凝膠2ml,動物出現(xiàn)明顯打鼾和間斷的呼吸暫停,仰臥位頭顱側(cè)位片顯示注射后軟腭后緣1/4點、1/2點、3/4點處上氣道寬度較對照組明顯狹窄,動脈血氣分析發(fā)現(xiàn)注射后動物睡眠發(fā)生呼吸暫停時血氧飽和度較對照組降低了22%。以上說明OSAHS動物模型建立成功。MAD組配帶下頜前移矯治器引導(dǎo)下頜向前。在同一麻醉狀態(tài)下,取左側(cè)腎臟沿最大徑剖開立即放入10%福爾馬林中固定,常規(guī)石蠟
3、包埋,切片,免疫組織化學(xué)染色,AX-80萬能顯微鏡下觀察腎皮質(zhì)VEGF表達,采用Miprd醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對切片進行分析。在400倍光鏡下,每張切片隨機選取10個視野,應(yīng)用分析系統(tǒng)的免疫組化自動分析程序得出積分光密度,取平均值。同時,取下腭咽部凝膠注射部位組織,固定于10%福爾馬林中,常規(guī)石蠟包埋、切片,HE染色,觀察其組織學(xué)結(jié)構(gòu)。對血液標(biāo)本和免疫組化結(jié)果應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,以P<0.05作為顯著性檢驗標(biāo)準(zhǔn)。
4、r> 結(jié)果:⑴仰臥位睡眠時,OSAHS組動物出現(xiàn)明顯的打鼾和間斷的呼吸暫停;MAD組動物部分呼吸均勻平穩(wěn)無打鼾,部分輕微打鼾;對照組動物呼吸均勻平穩(wěn),無打鼾和呼吸暫停。⑵OSAHS組軟腭1/4點、1/2點和3/4點OSAHS組明顯小于MAD組和對照組,差異有顯著性(P<0.05)。血氣分析:血氧飽和度、氧分壓和pH值OSAHS組明顯低于MAD組和對照組,差別有顯著性(P<0.05),二氧化碳分壓明顯高于對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0
5、.05)。⑶肉眼觀察凝膠白色透明,外有一層薄而透明的包膜,白色凝膠狀物質(zhì)地較韌且富有彈性,局限在軟腭軟組織中,邊界清楚,沒有向周圍組織擴散。光鏡下凝膠被染成藍色,與周圍組織界限清楚,凝膠外表面有一層排列整齊的膠原纖維和彈性纖維形成的薄層包膜,沒有引起組織營養(yǎng)不良現(xiàn)象和組織壞死,對周圍的組織沒有任何損傷。⑷OSAHS組ET-1和AngⅡ水平明顯高于MAD組和對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);MAD組ET-1和AngⅡ水平高于對照組,但
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