Dsg2表達及其SNPs在胃癌發(fā)生發(fā)展中的意義.pdf

1、研究背景：
　　胃癌是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一。細(xì)胞連接結(jié)構(gòu)的改變會降低細(xì)胞間粘附性、促進腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。Dsg2是細(xì)胞間粘附分子，其表達缺失在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移中起了重要作用。Dsg2表達在胃癌發(fā)生發(fā)展中的意義及其與臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系研究甚少。近年來研究發(fā)現(xiàn)許多與胃癌相關(guān)的基因SNPs在胃癌的發(fā)生發(fā)展中具有重要意義，然而Dsg2基因SNPs在胃癌發(fā)生發(fā)展中的意義尚無相關(guān)報道。
　　目的：
　　1、探討Dsg2表達在

2、胃癌發(fā)生發(fā)展中的意義及其與臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系。
　　2、探討Dsg2基因五個SNPs位點rs75530589（C/G）、rs34989303（A/G）、rs12611255（C/T）、rs35762773（C/T）、rs79381523（C/T）多態(tài)性與胃癌遺傳易感性的關(guān)系。
　　材料與方法：
　　1、免疫組化染色檢測Dsg2在胃癌中的表達。
　　1.1材料：收集了福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科2001年1

3、月至2010年12月間外科手術(shù)切除胃癌標(biāo)本存檔蠟塊共301例。
　　1.2方法：每例胃癌病例均選取癌旁正常胃粘膜組織、粘膜層癌組織、腫瘤中央?yún)^(qū)癌組織、侵襲前沿區(qū)癌組織和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶癌組織共5個位點，制作組織芯片，運用免疫組織化學(xué)方法分析Dsg2基因在胃癌、癌旁正常粘膜組織以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌中蛋白表達的水平。
　　2、PCR-LDR檢測胃癌Dsg2基因SNPs位點。
　　2.1材料：收集了從2001年1月至2010年12月

4、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院639例胃癌患者作為病例組，收集常規(guī)體檢的無腫瘤病史和家族腫瘤病史的健康人群498例作為對照組。
　　2.2方法：分別從病例組存檔福爾馬林固定-石蠟包埋癌旁正常組織和對照組新鮮全血提取基因組DNA，采用LDR方法分析Dsg2基因SNPs位點rs75530589（C/G）、rs34989303（A/G）、rs12611255（C/T）、rs35762773（C/T）、rs79381523（C/T）基因型以及等

5、位基因頻率。
　　結(jié)果：
　　1、Dsg2在正常胃粘膜中主要表達于粘膜上皮層，染色主要定位于細(xì)胞膜，在細(xì)胞與細(xì)胞之間部位表達相對較強。
　　2、粘膜層胃癌組織Dsg2表達明顯低于正常胃粘膜組織，染色定位于細(xì)胞膜和/或細(xì)胞漿，或者未見染色。
　　3、Dsg2的表達在高-中分化型及腸型胃癌組織高于低分化-未分化型和胃型胃癌組織。
　　4、進展期癌原發(fā)癌組織不同區(qū)域之間表達具有顯著性差異，侵襲前緣表達呈降低趨勢。

6、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌高于侵襲前緣的表達。
　　5、Dsg2表達及表達下調(diào)與胃癌患者生存時間之間的關(guān)系無顯著性意義。
　　6、Dsg2基因SNPs位點rs75530589的基因型和等位基因頻率分布在對照組和胃癌組之間具有顯著性差異，攜帶C等位基因胃癌患病風(fēng)險降低0.6231倍（OR(95％CI)=0.6231[0.5124-0.7578]）。男性人群中Dsg2基因rs75530589基因型及等位基因頻率在正常對照和胃癌組之間分布具有顯

7、著性差異。男性人群中攜帶C等位基因胃癌患病風(fēng)險降低0.5942倍,結(jié)合臨床病理學(xué)特征，發(fā)現(xiàn)無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；高、中、低分化胃癌組；腸型、胃型胃癌組；浸潤至漿膜層、突破漿膜層胃癌組以及賁門部胃癌組的基因型和等位基因頻率具有顯著性差異。
　　7、Dsg2基因SNPs位點rs34989303的基因型和等位基因頻率分布在對照組和胃癌組之間具有顯著性差異，攜帶A等位基因胃癌患病風(fēng)險增加1.9177倍（OR(95%CI)=1.9177[1.51

8、42-2.4287]）。男性、女性人群中Dsg2基因rs34989303基因型及等位基因頻率在正常對照和胃癌組之間分布具有顯著性差異。男性人群中攜帶A等位基因胃癌患病風(fēng)險增加1.7071倍,女性人群中攜帶A等位基因胃癌患病風(fēng)險增加2.3400倍。結(jié)合臨床病理學(xué)特征，發(fā)現(xiàn)rs34989303的基因型和等位基因頻率在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；高、中、低分化及特殊類型胃癌組；各Laure n分型；浸潤至深肌層、漿膜層及突破漿膜層胃癌組；中晚期胃癌組；

9、賁門、非賁門、胃體、胃竇胃癌組均具有顯著性差異。
　　8、Dsg2基因SNPs位點rs12611255的基因型和等位基因頻率分布在對照組和胃癌組之間具有顯著性差異，攜帶C等位基因胃癌患病風(fēng)險降低0.3968倍（OR(95%C I)=0.3968[0.3265-0.4821]），是一個保護因素。男性、女性人群中Dsg2基因rs34989303基因型及等位基因頻率在正常對照和胃癌組之間分布具有顯著性差異。男性人群中攜帶C等位基因胃癌患

10、病風(fēng)險降低0.4247倍,女性人群中攜帶C等位基因胃癌患病風(fēng)險降低0.2875倍。結(jié)合臨床病理學(xué)特征，發(fā)現(xiàn)rs12611255的基因型和等位基因頻率在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；中、低分化及特殊類型胃癌組；各Lauren分型；浸潤至粘膜下、深肌層、漿膜層及突破漿膜層胃癌組；早期、中晚期胃癌組；賁門、非賁門、胃體、胃竇及其他胃癌組均具有顯著性差異。
　　9、Dsg2基因SNPs位點rs35762773的基因型和等位基因頻率分布在對照組和胃癌組

11、之間無顯著性差異。但是，在組織分化方面，中分化組胃癌與正常對照組具有顯著性差異；在浸潤深度方面，浸潤至淺肌層胃癌與正常對照組具有顯著性差異。
　　10、Dsg2基因SNPs位點rs79381523的基因型和等位基因頻率分布在對照組和胃癌組之間無顯著性差異。
　　11、Dsg2基因SNPs位點rs75530589、rs34989303、rs12611255、rs35762773、rs79381523各基因型與胃癌術(shù)后生存時間均

12、無明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　1、Dsg2在正常胃粘膜中主要表達于粘膜上皮層，染色主要定位于細(xì)胞膜，在細(xì)胞與細(xì)胞之間部位表達相對較強。Dsg2在胃癌組織中表達下調(diào)，染色定位于細(xì)胞膜和/或細(xì)胞漿，或者未見染色。
　　2、粘膜層胃癌組織Dsg2表達明顯低于正常胃粘膜組織，提示Dsg2的表達下調(diào)與胃癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，在胃型胃癌中相關(guān)性更為顯著。
　　3、Dsg2在進展期胃癌組織中具有顯著的異質(zhì)性，且在侵襲前緣表達有進

13、一步下調(diào)趨勢，提示其缺失在胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移中起了重要作用。
　　4、Dsg2在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌中表達明顯高于原發(fā)癌侵襲前緣，提示其再表達促使轉(zhuǎn)移瘤的形成。
　　5、尚不能認(rèn)為Dsg2表達及表達下調(diào)與胃癌患者預(yù)后相關(guān)。
　　6、Dsg2基因SNPs位點rs75530589、rs34989303、rs12611255多態(tài)性與胃癌的遺傳易感性相關(guān)，并可能與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、分型分期、侵襲性以及發(fā)生部位等臨床病理學(xué)特征具有相