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1、本文主要研究多壁碳納米管修飾電極的制備及其在DNA電化學(xué)生物傳感器研究中的應(yīng)用。為了讓多壁碳納米管能夠通過Au-S鍵直立地生長(zhǎng)在金電極表面,文中通過強(qiáng)酸氧化法(H2SO4:HNO33:1;98%,70%)將羧基化的多壁碳納米管(1-5μm)切短成小短段(200~300 nm),然后用巰基乙胺來功能化短段多壁碳納米管,進(jìn)而將多壁碳納米管修飾上巰基。通過檸檬酸鈉還原法制備了粒徑為16 nm的金納米粒子。然后,利用自組裝單分子膜法,將多壁碳納
2、米管、金納米粒子和5’端修飾有巰基的HS-DNA片段固定在金電極表面,進(jìn)而制備成了DNA探針電極,結(jié)合染料類指示劑2,6-二磺酸基蒽醌(AODS)構(gòu)成DNA電化學(xué)傳感器。在DNA探針的固定過程中,探討了各層自組裝單分子膜的成膜條件,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,巰基化多壁碳納米管室溫下在金電極表面的最佳修飾時(shí)間為7小時(shí),金納米粒子的最佳固定時(shí)間3小時(shí),當(dāng)探針濃度為100ug/mL,4℃自組裝12小時(shí)對(duì)DNA探針的固定較為有利。
利用制成的
3、DNA電化學(xué)傳感器對(duì)溶液中標(biāo)準(zhǔn)濃度的互補(bǔ)DNA進(jìn)行定性和定量檢測(cè),在對(duì)標(biāo)準(zhǔn)互補(bǔ)DNA溶液的雜交檢測(cè)過程中,探討了雜交時(shí)間、雜交溫度、指示劑的選擇、吸附條件、電化學(xué)掃描條件等對(duì)DNA傳感器雜交檢測(cè)的影響。結(jié)果表明,AQDS是一種特異性較強(qiáng)的指示劑,能夠?qū)NA片段上的堿基——胸腺嘧啶氧化,從而使得響應(yīng)電流發(fā)生變化,有效區(qū)分互補(bǔ)與非互補(bǔ)序列。當(dāng)雜交時(shí)間為60min,雜交溫度為40℃,雜交底液中Na+濃度為0.3mol/L時(shí),指示劑作用后的信
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