中華稻蝗蛋白的提取、酶解及抗氧化肽的研究.pdf

1、蝗蟲體內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)、人體必需氨基酸、維生素、微量元素和不飽和脂肪酸等，具有較高的開發(fā)價值。本文對中華稻蝗蛋白提取、酶解和抗氧化肽的發(fā)現(xiàn)進行了研究。結(jié)果如下： 蝗蟲蛋白質(zhì)含量高，氨基酸組成合理，必需氨基酸種類齊全，是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)資源。 中華稻蝗各類型蛋白質(zhì)的提取率分別為：一次水溶蛋白26.5％、二次水溶蛋白21.9％、酸溶性蛋白質(zhì)2.8％、堿溶性蛋白質(zhì)1.2％、醇溶性蛋白質(zhì)0.3％。中華稻蝗蛋白質(zhì)以水溶性蛋白質(zhì)(48

2、.4％)為主，易被人及其它動物吸收利用。 中華稻蝗水溶性蛋白提取的最佳工藝條件為料液比(g/mL)為1∶15，提取液pH7.4，NaCl濃度為1.0％，提取時間為4h。 比較了不同蛋白酶酶解中華稻蝗蛋白的條件及酶解物的抗氧化活性，確定了Alcalase堿性蛋白酶為首選酶。 研究了用Alcalase堿性蛋白酶對中華稻蝗蛋白成分進行酶解處理的影響因素，確定了適宜的酶解條件為：底物濃度3.0％，酶用量(V/V，％)10

3、％、pH8.0，酶解溫度55℃，作用時間4h。中華稻蝗蛋白質(zhì)經(jīng)酶解處理獲得的多肽混合溶液具有較高的抗氧化活性，對鄰苯三酚自氧化的抑制率可達40％。 在非油質(zhì)體系中，酶解物能很好的清除超氧陰離子自由基，但清除效果不如VC的效果好；酶解物清除羥基自由基的效果與VC相當；清除DPPH自由基和其還原能力強于VC。 在油質(zhì)體系中，酶解物能很好的抑制豬油和亞油酸的自氧化的發(fā)生，延長亞油酸自氧化的誘導期。 通過Sephadex

4、G-25凝膠過濾色譜，酶解物被分離成四個組分，四個組分中組分Ⅲ的抗氧化活性最強。 利用強酸性陽離子交換色譜將組分分離成三部分。組分Ⅱ?qū)︵彵饺幼匝趸?PR)的抑制率遠大于組分Ⅰ和組分Ⅲ，對組分Ⅱ進行下一步的分離。 利用強堿性陰離子交換色譜組分Ⅱ被分離成三個組分，其中組分B的抑制率最高。將組分B進行下一步的分析。 經(jīng)過硅膠板薄層色譜，色譜板上呈現(xiàn)多個斑點，這說明經(jīng)過三步分離純化的組分中所含的多肽仍然一個混合的多肽，

5、要想得到純的多肽需進一步分離。 酶解物可顯著提高受試小鼠血清、肝組織、腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)過氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的活性，而顯著降低其體內(nèi)丙二醛(MDA)的含量及單胺氧化酶(MAO)的活性，結(jié)果說明：中華稻蝗蛋白酶解物對小鼠的衰老具有很好的保護作用。 酶解物能明顯延長小鼠負重游泳時間、降低運動后血清尿素氮(BUN)含量、減少肝糖原的消耗量、提高血清乳酸脫氫酶(LDH)的活性，結(jié)