豬肝磷脂綜合開(kāi)發(fā)利用的初步研究.pdf

1、畜禽副產(chǎn)物的開(kāi)發(fā)利用與現(xiàn)代生物科技緊密結(jié)合，具有科技含量高、附加值高等特點(diǎn)。肝臟為豬屠宰后的主要副產(chǎn)品之一，約占豬體重的1.4％。豬肝的營(yíng)養(yǎng)成分及其豐富，每百克豬肝含蛋白質(zhì)21.3克，是豬肉的兩倍，含脂肪4.5克，碳水化合物1.4克，并含有多種維生素和礦物質(zhì)元素。但肝中脂肪熔點(diǎn)低(26-34℃)，在加工過(guò)程中極易熔化、流失和氧化，造成原料利用率低、成品率低，營(yíng)養(yǎng)損失嚴(yán)重等系列問(wèn)題。此外，肝臟是代謝中心站和解毒器官，又是膽固醇含量較高的部

2、位，故人們?cè)谥苯邮秤脮r(shí)，也會(huì)有所顧慮。因此，如何開(kāi)發(fā)豬肝新產(chǎn)品，提高豬肝的附加值，引起了人們極大關(guān)注。
　　 磷脂是動(dòng)物細(xì)胞膜的重要組分之一，具有廣泛的生理活性。研究表明，動(dòng)物肝臟中磷脂豐富，豬肝中磷脂含量為3.3.3.4％。同時(shí)，在哺乳動(dòng)物肝臟中，除了CDP.膽堿通路外，還存在一條肝臟特有的PC合成通路--PEMT通路。而且，相較于植物源卵磷脂，動(dòng)物肝臟中磷脂不飽和脂肪酸含量更高，并含有一些特有的功能分子。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)磷脂的

3、研究和開(kāi)發(fā)多集中于大豆，對(duì)動(dòng)物性的肝臟磷脂的研究報(bào)道還不多見(jiàn)。因此，豬肝磷脂產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)及產(chǎn)業(yè)化研究具有重要的意義。
　　 本文首先選用經(jīng)典的Folch法，以實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果為基礎(chǔ)，建立了分離制備豬肝磷脂的簡(jiǎn)易方法，并初步優(yōu)化和放大了提取的工藝條件。其次，利用食品儲(chǔ)存期加速測(cè)試法(ASLT)和高效液相色譜(HPLC)法等對(duì)豬肝磷脂的理化性質(zhì)、穩(wěn)定性和安全性做了研究。然后，以小鼠為研究對(duì)象進(jìn)行了豬肝磷脂生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)，包括：(1)

4、行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，如跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)(2)抗氧化功能實(shí)驗(yàn)(3)骨骼肌細(xì)胞膜流動(dòng)性實(shí)驗(yàn)(4)酒精損傷實(shí)驗(yàn)(5)窖蛋白-1(Cav-1)和蛋白激酶C(PKCa)蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)豬肝磷脂綜合利用的初步研究，旨在為開(kāi)發(fā)磷脂制劑保健品提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 結(jié)果：
　　 1、豬肝磷脂主要成分包括：心磷脂(CL)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇/磷脂酰絲氨酸(PI/PS)、磷脂酰膽堿(PC)和鞘磷脂(SM)。其中，PC為主要成份

5、，達(dá)58.3％，PE、CL、SM、PI、PS含量分別為25％、8.5％、5.6％、2.6％。
　　 2、以250g豬肝為標(biāo)準(zhǔn)，氯仿：甲醇=2:1為最優(yōu)比例，劑量為800ml和400ml時(shí)最佳。萃取溫度選擇4℃和20℃均可，萃取時(shí)間2h為宜。丙酮萃取比例為總脂和丙酮的質(zhì)量體積比3：1時(shí)為宜。
　　 3、250g豬肝可提取出1.6g肝磷脂物質(zhì)，占總肝磷脂的66％。豬肝磷脂為白色、無(wú)味、常溫為固體顆粒、熔點(diǎn)53℃、密度0.91

6、g/cm3。
　　 4、大豆磷脂的穩(wěn)定性高于豬肝磷脂；添加維生素E可延長(zhǎng)豬肝磷脂的保存期。經(jīng)HPLC法檢測(cè)提取物磷脂，未檢測(cè)出磺胺類藥物殘留。
　　 5、生物學(xué)功能檢測(cè)表明：
　　 (1)豬肝磷脂可以明顯提高小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和空間探索能力，表現(xiàn)在小鼠逃避潛伏期(EL)和下臺(tái)累積錯(cuò)誤次數(shù)(M)減少、中央格停留時(shí)間降低、站立次數(shù)增加；
　　 (2)豬肝磷脂可以顯著增強(qiáng)小鼠骨骼肌細(xì)胞抗氧化能力，表現(xiàn)在細(xì)胞的丙二

7、醛(MDA)含量下降、超氧化物歧化酶(SOD)含量升高、Na+-K+-ATP酶活性升高，膜的流動(dòng)性增強(qiáng)；
　　 (3)豬肝磷脂具有對(duì)酒精肝損傷的保護(hù)作用，使小鼠肝細(xì)胞谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量降低、MDA含量降低、還原型谷胱甘肽(GSH)活性升高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，肝磷脂可以明顯促進(jìn)小鼠肝細(xì)胞內(nèi)Cav-1蛋白和：PKCa蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)論：
　　 1、經(jīng)過(guò)豬肝磷脂提取工藝的優(yōu)化，肝磷脂得率較高，為66％，且安全性高。