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1、鼠李糖脂為生物表面活性劑中較為常用的一種,以其優(yōu)越的表面活性有著廣闊的應(yīng)用前景,其特性包括低毒性、高生物降解性及環(huán)境友好。
本實(shí)驗(yàn)使用銅綠假單胞桿菌發(fā)酵鼠李糖脂,在搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)的基礎(chǔ)上對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定了最佳培養(yǎng)基組成,氮源濃度、磷源濃度、微量元素用量分別為3.2g/L、13.76g/L和5.17mL,理論的最大產(chǎn)量為8.48g/L。
在5L罐發(fā)酵的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了不同轉(zhuǎn)速下的間歇發(fā)酵,找出了滿足好氧發(fā)酵的最適
2、轉(zhuǎn)速。同時(shí)對(duì)鼠李糖脂的發(fā)酵工藝進(jìn)行了改進(jìn),通過(guò)pH的分段控制,使底物更多的由菌體增殖向產(chǎn)物生產(chǎn)方向利用,產(chǎn)量相較之前提高了20%,在此基礎(chǔ)上對(duì)間歇發(fā)酵的發(fā)酵動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究,建立了菌體生長(zhǎng)、產(chǎn)物生成以及底物消耗的發(fā)酵動(dòng)力學(xué)模型,并能很好的模擬發(fā)酵過(guò)程。通過(guò)分析發(fā)酵動(dòng)力的方程,可以預(yù)測(cè)在補(bǔ)料下產(chǎn)量能有進(jìn)一步的提升。最終通過(guò)優(yōu)化的發(fā)酵工藝并在補(bǔ)料發(fā)酵下,鼠李糖脂產(chǎn)量達(dá)到了70.56g/L,較之前提高了1.93倍。
建立了穩(wěn)定的中試
3、發(fā)酵工藝及分離工藝,包括:采用10%的接種量逐級(jí)放大、原位蒸汽滅菌、增加多級(jí)種子培養(yǎng)工藝、其補(bǔ)料的時(shí)間點(diǎn)從原來(lái)5L罐水平的24h,48h,72h調(diào)整為20h,40h,60h等。采用二次蒸餾工藝(大規(guī)模分離工藝)及膜分離(高純度分離工藝)提取分離鼠李糖脂。最終的發(fā)酵產(chǎn)量很好的維持了之前的優(yōu)化結(jié)果,達(dá)到70g/L。
使用液質(zhì)聯(lián)用儀分析鼠李糖脂樣品的組分。鼠李糖脂樣品經(jīng)分析后,其共含有54種同系物,并找出四類同系物的一般代表結(jié)構(gòu)。鼠
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