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文檔簡介
1、蛋白質是一類具有生物活性的生物大分子,其離體后的穩(wěn)定性較差,在分離純化過程中極易變性,從而為提取分離具有生物活性的蛋白質增加了難度。蛋白質組學和蛋白質工程研究的發(fā)展,對從復雜基體(如生物、醫(yī)藥和環(huán)境樣品)中溫和、高效、高選擇性地分離富集痕量蛋白質的前處理技術提出了迫切要求。發(fā)展具有生物相容性的固相萃取新方法和新材料以實現(xiàn)復雜生物樣品中蛋白質的分離和純化是解決當前問題的一個可行方案。
本論文采用超枝化陽離子聚合物非共價修飾多壁碳
2、納米管,改變了碳納米管表面的親水性和電荷性質,避免了共價接枝方法對碳納米管結構的破壞或引入對蛋白質具有非特異性吸附的基團,提高了碳納米管的分離性能。對聚合物修飾的多壁碳納米管進行了紅外(FT-IR)、熱重(TGA)、透射電鏡(TEM)、Zeta電位等表征。
以超枝化陽離子聚合物修飾的多壁碳納米管(BPEI-MWNTs)為固相吸附材料填柱,并與順序注射系統(tǒng)聯(lián)用,實現(xiàn)了在線選擇性分離富集牛血清白蛋白(BSA)。萃取前后的BSA經(jīng)過
3、圓二色光譜檢測,證實從萃取柱表面回收的BSA沒有發(fā)生結構變化。而且BPEI-MWNTs能夠為吸附蛋白提供更多的結合位點,能有效消除吸附層中蛋白質之間的橫向排斥作用,從而有效增大了BPEI-MWNTs對BSA的吸附容量,即167mgg-1,是線性聚合物二甲基二烯丙基氯化銨修飾的多壁碳納米管(PDDA-MWNTs)萃取BSA方法的6倍。在最佳實驗條件下,當進樣體積和洗脫體積分別為2.0mL和200μL時,25μgmL-1牛血清白蛋白的保留效
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