光譜分辨多焦點(diǎn)多光子顯微成像系統(tǒng)研究.pdf

1、熒光顯微技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的強(qiáng)大工具。熒光具有多參量特性，其中熒光光譜的測(cè)量可以鑒別不同種類的熒光團(tuán)；而熒光壽命測(cè)量可以對(duì)熒光分子所處微環(huán)境進(jìn)行定量分析，而且對(duì)于鑒別光譜重疊的多組分熒光團(tuán)非常有效。多焦點(diǎn)多光子顯微技術(shù)（Multifocal Multiphoton Microscopy，MMM）可以實(shí)現(xiàn)樣品的三維快速多光子激發(fā)熒光顯微成像，并具有對(duì)活體樣品損傷小，成像深度大，圖像信噪比高等優(yōu)點(diǎn)。
　　 本論文的研究目標(biāo)

2、是將基于棱鏡色散的光譜分辨技術(shù)和MMM技術(shù)結(jié)合，發(fā)展一種能夠快速獲取樣品三維空間光譜信息的多光子激發(fā)熒光顯微測(cè)量和成像技術(shù)，為多色標(biāo)記成像、FRET以及熒光比率測(cè)量等生物學(xué)研究提供了非常重要的檢測(cè)手段。本論文的主要研究?jī)?nèi)容是設(shè)計(jì)并搭建光譜分辨的多焦點(diǎn)多光子顯微成像系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)生物樣品的快速三維空間的光譜測(cè)量和成像。并進(jìn)一步研究基于光譜分辨的多焦點(diǎn)多光子熒光壽命成像顯微系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)生物樣品的光譜及壽命測(cè)量。本論文具體完成了以下幾方面的研究工

3、作：
　　 1討論了與本課題研究?jī)?nèi)容相關(guān)的熒光顯微技術(shù)基礎(chǔ)及其發(fā)展現(xiàn)狀。
　　 2設(shè)計(jì)并搭建了具有光譜分辨功能的多焦點(diǎn)多光子顯微成像系統(tǒng)，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行快速三維空間的光譜數(shù)據(jù)采集。
　　 3研究了熒光光譜信息的分析及處理方法，并對(duì)光譜分辨多焦點(diǎn)多光子顯微成像系統(tǒng)的光譜分辨率和系統(tǒng)放大倍率等進(jìn)行了標(biāo)定。.
　　 4研究了光譜分辨多焦點(diǎn)多光子顯微成像系統(tǒng)的圖像重構(gòu)方法，實(shí)現(xiàn)了強(qiáng)度圖像和不同光譜的強(qiáng)度圖像的