黃霉素產(chǎn)生菌的菌種選育和發(fā)酵工藝的研究.pdf

1、本論文通過(guò)研究黃霉素產(chǎn)生菌株的選育及其發(fā)酵工藝條件優(yōu)化，所得研究結(jié)果與我公司2010年初黃霉素菌株的效價(jià)水平相比，搖瓶效價(jià)提高了2355u/mL，50L中試發(fā)酵罐效價(jià)水平提高了1647u/mL（連續(xù)三批中試產(chǎn)品的平均值），顯著降低了我公司黃霉素產(chǎn)品的生產(chǎn)成本。
　　首先，通過(guò)氮離子注入誘變法確定黃霉素產(chǎn)生菌耐自身代謝產(chǎn)物的濃度。通過(guò)比較不同劑量氮離子注入誘發(fā)的黃霉素產(chǎn)生菌株的致死率和正突變率結(jié)果，確定出最佳氮離子注入劑量。黃霉素產(chǎn)

2、生菌經(jīng)誘變，其單菌形態(tài)發(fā)生了很大變化。經(jīng)實(shí)驗(yàn)得出，發(fā)酵產(chǎn)素能力高的菌株呈表面光滑，邊緣無(wú)皺褶或少量皺褶。經(jīng)過(guò)大量的初篩和復(fù)篩后，得到一株黃霉素高產(chǎn)菌株，且遺傳穩(wěn)定性良好。
　　其次，對(duì)高產(chǎn)菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基配方，如碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、表面活性劑等原材料進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳培養(yǎng)基配方為：葡萄糖濃度4％，玉米漿濃度3%，黃豆餅粉濃度1%，K2HPO4濃度0.20%，NaCl濃度0.3%，MgSO4濃度0.06%，CaCO3濃度0.03%，

3、有機(jī)硅消泡劑濃度0.12%；經(jīng)過(guò)PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)曲面試驗(yàn)設(shè)計(jì)，得出影響黃霉素發(fā)酵效價(jià)的三個(gè)重要因素及其濃度，葡萄糖：濃度5.56%，玉米漿：濃度1.15%，黃豆餅粉：濃度2.56%。
　　再次，對(duì)所得高產(chǎn)菌株的發(fā)酵條件，如溫度、pH、裝液量、接種量、種齡、轉(zhuǎn)速等進(jìn)行了優(yōu)化研究，得到最佳發(fā)酵條件為：溫度37℃，裝液量100mL，pH5.0，種齡26h，接重量10﹪，轉(zhuǎn)速210rpm；經(jīng)過(guò)PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)曲面試驗(yàn)設(shè)計(jì)，得出影響黃霉