牛奶中蛋白質(zhì)和17種β-興奮劑的分析方法研究.pdf

1、牛奶營(yíng)養(yǎng)豐富，是人們?nèi)粘Ｉ钪胁豢扇鄙俚娘嬈?，牛奶質(zhì)量和食用安全一直備受關(guān)注，牛奶質(zhì)量問(wèn)題主要來(lái)源于兩方面，一是非蛋白氮的非法添加，二是奶牛食用飼料中添加的獸藥或者藥用獸藥殘留引起的。因此，研究建立方法測(cè)定牛奶中蛋白質(zhì)的含量，及檢測(cè)獸藥殘留量具有重要意義。
　　 本文建立了測(cè)定牛奶蛋白質(zhì)的反相高效液相色譜分析方法，對(duì)前處理方法進(jìn)行了優(yōu)化，采用Agilent Zorbax300SB-C8(250 mm×4.6 mm，5μm)色譜柱

2、分離，三氟乙酸-水-乙腈做為流動(dòng)相，梯度洗脫，紫外檢測(cè)器，214nm單波長(zhǎng)檢測(cè)，柱溫45℃，外標(biāo)法定量。測(cè)定κ-CN、αs2-CN、αs1-CN、β-CN和Whey的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，加標(biāo)回收率在74.8％～132.5％之間。另外，該方法可以分離大豆的植物蛋白質(zhì)和牛奶中主要蛋白質(zhì)，因此，可作為牛奶中添加植物蛋白質(zhì)的檢測(cè)方法。
　　 采用本方法分析了9種牛奶樣品蛋白質(zhì)的含量，結(jié)果表明，本方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

3、不同樣品中4種酪蛋白與乳清蛋白的比例基本接近，但是不同品牌之間存在一定差異。
　　 本文建立了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)牛奶中17種β-興奮劑。牛奶樣品前處理過(guò)程采用3％的三氯乙酸水溶液沉淀蛋白質(zhì)，4℃，5000rpm離心去脂，取上層清液，經(jīng)Waters Oasis MCX固相萃取柱凈化，洗脫液經(jīng)氮?dú)獯蹈?，然后用流?dòng)相復(fù)溶，過(guò)濾。采用Waters XBridge TMShield RP18(50 mm×2.1mm，2.5μm

4、)色譜柱，以0.1％甲酸溶液-甲醇為流動(dòng)相，梯度洗脫，進(jìn)行液相色譜分離，最終采用電噴霧串聯(lián)四極桿質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，除氧烯洛爾(12.33～493.20 ng·mL-1)外，其余16種藥物在0.37～24.40 ng·mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.997。3個(gè)水平添加，樣品的平均加標(biāo)回收率為61.6％～115.7％。17種藥物的方法檢出限為0.024～3.96 ng·g-1，方法定量限為0.354～13.20ng·