重組桿狀病毒在氣升式反應(yīng)器中感染懸浮昆蟲(chóng)細(xì)胞HzAM1的感染策略優(yōu)化.pdf

1、在重組蛋白和生物殺蟲(chóng)劑的工業(yè)化生產(chǎn)中,如何提高其產(chǎn)量越來(lái)越受到重視。利用昆蟲(chóng)細(xì)胞-桿狀病毒表達(dá)體系來(lái)實(shí)現(xiàn)其工業(yè)化生產(chǎn)也越來(lái)越受到關(guān)注。在以往的研究中,主要通過(guò)幾個(gè)方面去優(yōu)化昆蟲(chóng)細(xì)胞-桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng):細(xì)胞株;培養(yǎng)基;溶氧;生物反應(yīng)器和感染策略(感染策略包括感染復(fù)數(shù)(MOI)、感染時(shí)間(TOI)、細(xì)胞初始濃度、培養(yǎng)基的替換等)。利用昆蟲(chóng)細(xì)胞-桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)重組蛋白和生物殺蟲(chóng)劑的大規(guī)模生產(chǎn),不僅需要提高桿狀病毒在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的表達(dá);而

2、且還需要大量的細(xì)胞。要想得到大量的細(xì)胞,必須要在生物反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng),而提高病毒的產(chǎn)量必須優(yōu)化其感染策略。
　　本研究利用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)在氣升式反應(yīng)器中對(duì)感染復(fù)數(shù)、感染時(shí)間、細(xì)胞初始濃度和溶氧值4個(gè)因素進(jìn)行分析研究,得到其對(duì)非包含體病毒(BV)和包含體病毒(OV)產(chǎn)量的影響,并優(yōu)化得到最佳感染條件。結(jié)果表明在氣升式反應(yīng)器中桿狀病毒感染懸浮昆蟲(chóng)細(xì)胞的最佳感染條件為初始細(xì)胞濃度為2.0×105cells/ml,在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期初期接