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1、以苯丙酮酸為底物,通過(guò)酶促反應(yīng)制備L-苯丙氨酸分為兩步:一是亞芐基海因水解制備苯丙酮酸;二是以苯丙酮酸和天冬氨酸為原料,通過(guò)菌體內(nèi)的轉(zhuǎn)氨酶將天冬氨酸上的氨基轉(zhuǎn)到苯丙酮酸上生成苯丙氨酸.這是一個(gè)很復(fù)雜的生物反應(yīng)體系,對(duì)這一體系的測(cè)定方法迄今未見報(bào)道.液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在對(duì)有機(jī)合成,生物反應(yīng)過(guò)程的原料及產(chǎn)品雜質(zhì)分析、中間產(chǎn)物監(jiān)測(cè)及反應(yīng)機(jī)理研究方面有著巨大的應(yīng)用價(jià)值和廣泛的應(yīng)用前景.本文將液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用于酶法生產(chǎn)L-苯丙氨酸體系的研究,根據(jù)其生產(chǎn)
2、工藝的特點(diǎn),分別建立了亞芐基海因水解制備苯丙酮酸生產(chǎn)體系和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶生產(chǎn)L-苯丙氨酸體系的定性定量檢測(cè)方法,為優(yōu)化反應(yīng)條件提供了方法,為整個(gè)L-苯丙氨酸生產(chǎn)體系的監(jiān)控提供了有效的分析手段.建立了亞芐基海因和苯丙酮酸的液相色譜定性定量檢測(cè)方法,討論了流動(dòng)相的流速、極性等因素對(duì)亞芐基海因和苯丙酮酸容量因子和保留時(shí)間的影響.對(duì)液質(zhì)聯(lián)用中涉及到的各種電噴霧電離參數(shù)(CUR、IS、TEM、GS1、GS2)和質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)(DP、FP、EP、CE
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