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1、本文主要研究?jī)?nèi)容為高效解磷能力菌株的篩選及鑒定、不同解磷菌株混合發(fā)酵、解磷細(xì)菌菌劑及固體肥料的研制及其應(yīng)用效果,主要結(jié)果如下:
(1)從水稻根際共分離出13株具有解無機(jī)磷能力的菌株,選取其中4株(Pc1、Pc3、Pp2、Pp3)解磷能力較強(qiáng)的菌株作為研究對(duì)象,根據(jù)生理生化特征,鑒定菌株P(guān)c1、Pc3、Pp3屬于芽孢桿菌屬(Bacillus),菌株P(guān)p2屬于土壤單胞菌屬(Agromonas)。以不同的碳氮源、可溶性磷量及pH
2、配制培養(yǎng)基,研究碳氮源、碳氮量、可溶性磷、pH、不同處理方法對(duì)細(xì)菌解磷能力影響。結(jié)果表明,同一菌株在不同碳氮源培養(yǎng)基上,表現(xiàn)出的解磷能力差異較大,碳源量的改變對(duì)菌株P(guān)c1的解磷能力影響顯著,而菌株P(guān)c3、Pp2、Pp3的解磷能力則易受氮源量影響;加入可溶性磷對(duì)細(xì)菌解磷能力無顯著影響;pH對(duì)菌株P(guān)c1、Pc3、Pp3解磷能力有顯著影響,對(duì)菌株P(guān)p2則無顯著影響;經(jīng)超聲波、微波和熏蒸處理測(cè)定各菌株溶磷量,可以準(zhǔn)確的比較各菌株解磷能力的強(qiáng)弱。
3、
(2)將1株具有降解難溶性磷能力的芽孢桿菌P8接種于以磷酸鈣為唯一磷源的液體培養(yǎng)基中,對(duì)其降解磷酸鈣效果及動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究,并將其制成解磷菌劑,進(jìn)行豇豆盆栽試驗(yàn)。結(jié)果表明,該菌株具有穩(wěn)定的溶磷活力,其降解率與生物量之間無顯著關(guān)系。對(duì)磷酸鈣降解動(dòng)力學(xué)的研究表明,在培養(yǎng)基a、b、c中,芽孢桿菌P8降解磷酸鈣動(dòng)力學(xué)方程遵循零級(jí)反應(yīng)。在相同培養(yǎng)條件下,提高葡萄糖或磷酸鈣的初始濃度(限于試驗(yàn)濃度范圍),均能提高芽孢桿菌P8降解磷酸鈣
4、的速率。豇豆盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,以芽孢桿菌P8制成的解磷菌劑對(duì)豇豆生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用,且添加適量的過磷酸鈣時(shí),豇豆的莖長(zhǎng)、根長(zhǎng)及地上部鮮質(zhì)量均有顯著提高,而添加適量的碳源,與對(duì)照相比,無顯著差異。
(3)利用C35組合設(shè)計(jì)對(duì)5株具有較強(qiáng)解磷能力的解磷細(xì)菌進(jìn)行混合發(fā)酵,得到具有良好協(xié)同作用的菌株組合(Bc、Bs、Ap1),通過正交試驗(yàn)確定其降解土壤中難溶性磷的最佳接種量,制得解磷菌劑BBA,并進(jìn)行白菜盆栽試驗(yàn)。結(jié)果表明:解
5、磷菌劑BBA的最佳接種比例為Bc2%、Bs6%、Apl6%;以該最優(yōu)接種比例接種,在溫度30℃、搖床轉(zhuǎn)速140 r·min-1條件下培養(yǎng)7 d后,土壤懸液有效磷(扣除對(duì)照值)含量高達(dá)6.38 mg·L-1;盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,此解磷菌劑對(duì)白菜根長(zhǎng)、株高及地上部鮮質(zhì)量均具有良好的促進(jìn)作用。
(4)在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,對(duì)固體肥料載體、吸附劑及接種比例進(jìn)行正交設(shè)計(jì),以活菌數(shù)為指標(biāo),獲得最優(yōu)組合,其最優(yōu)方案是A1B2D3C1,即泥
6、炭與硅藻土質(zhì)量比為1:1,山核桃殼粉為1.5 g,菌液為2.5 mL,麥芽糊精為2 g。將其置于28℃下培養(yǎng)7天即制得固體肥料BBA。白菜盆栽試驗(yàn)表明,經(jīng)自制固體肥料處理后白菜的根長(zhǎng)、株高和地上部鮮質(zhì)量均較對(duì)照值高,表明此固體肥料對(duì)白菜生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用。
(5)在含有一定Cd2+濃度Pikovaskaia's(PKO)培養(yǎng)基接種BBA菌液,測(cè)定發(fā)酵液Cd2+濃度、BBA溶磷量及生物量,并進(jìn)行白菜平板試驗(yàn)。結(jié)果表明BB
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